【求助】ECL在不洗脱抗体的情况下再加一次为什么没有用？

最新回复

• 大海啊故乡 (2014-4-01 16:31:40)

  QUOTE:

  原帖由 coolcool 于 2014-4-1 16:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我们的ECL液很烂，过了20分钟就啥也没有了，我尝试过重加ECL，发现没有用。请问这是不是因为ECL底物和膜上的酶是结合后才反应，会占据酶的反应位点，而这种结合不可逆，所以导致后来的底物分子结合不上？
  请大家指教！ ...

  没必要追究

• fei1226com (2014-4-01 16:32:49)

  
  不是不可逆结合，应该是你的化学发光剂出问题了，我用pierce的supersignal，一张膜加化学发光剂可以反复用来曝光4-5次。

• coolcool (2014-4-01 16:38:28)

  我不是问能不能反复曝光，而是问能不能反复加发光剂
  反复曝光当然是能的咯

• one (2014-4-01 16:39:46)

  能，两张2.5*7.5的膜，我起初用600微升，曝光后明显弱，20分钟后又加一次，曝光1分钟非常好。

• tuuu2 (2014-4-01 16:40:30)

  
  当然是指能反复加发光剂了,不加发光剂怎么曝光呢?一张膜可以反复加4-5次用来曝光.

• coolcool (2014-4-01 16:42:50)

  
  再加发光剂之前还用把原来的ECL洗掉吗？

• tuuu2 (2014-4-01 16:45:52)

  
  不用洗的，直接加就可以了

• abc816 (2014-4-01 16:46:25)

  
  感觉洗一下再加ECL比较好的.但是第二次加上后压片的时间比较长.

• 小野花 (2014-4-01 16:47:54)

  
  ECL的量到底是加多的好，还是只要没过膜就可以了？

• coolcool (2014-4-01 16:50:31)

  我的膜是4X7,300ul足够了。
  加太多也没用