【求助】western blot 显像问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-4-05 10:13 作者: BUK 来源: 分析测试百科网

我买的stanta的抗体，建议最高浓度是1：200，我第一次做的时候用的1：200，结果条带还好，背景也很干净。后来隔了几天之后这个浓度就做不出来了（其它的条件都没变），增加到1：160时还是没有条带，但背景已经有些高，再加到1：125时出现了两条带（正常是一条），而且背景变得很高，请教各位高手这是怎么回事啊？

查看完整版本请点击这里：
【求助】western blot 显像问题

我也来说两句查看全部回复

最新回复

nikun230 (2014-4-05 10:14:17)

抗体保存在什么条件下?
保存于-20度的抗体如果反复冻融3次以上，抗体的效价就会大大降低。
你看看你的有没有这种可能？
BUK (2014-4-05 10:15:24)

说明书上讲的是2~8度保存，我就放在四度冰箱了
sunshine039 (2014-4-05 10:15:44)

是不是你这两次的样本提取不是同一批？
BUK (2014-4-05 10:16:06)

QUOTE:
原帖由 sunshine039 于 2014-4-5 10:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

是不是你这两次的样本提取不是同一批？
是同一批啊
BUK (2014-4-05 10:42:43)

终于出来了，原来是我做出来的那次无意中延长了转膜时间，因为每次膜上的MAKER 转的还行，所以没往这方面考虑，没想到十几分钟的转膜时间有这么大的影响。
至于下方的条带好像跟内参是同一个位置，也许是不小心弄上的内参？
vtongli (2014-4-05 10:44:00)

记住了，以后要分装抗体！
vtongli (2014-4-05 10:45:38)

什么抗体？要4度保存？