最新更新主题

【求助】小分子蛋白的westonblot

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-4-12 09:02    作者: she    来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】小分子蛋白的westonblot

同志们战友们：
我想要检测一个大约10KD左右的小分子蛋白，请问做WESTON时的转膜时间和电压电流选多大合适。急啊！烦请各位高手多多指教。
查看完整版本请点击这里：
【求助】小分子蛋白的westonblot

我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • 8princess8 (2014-4-12 09:02:49)

    10V, 15min for nitrocellulose/semi-dry is enough.
    not sure about wet transfer.

  • she (2014-4-12 09:03:09)

    谢谢 我的是湿转 条件应该怎样优化

  • taoshengyijiu (2014-4-12 09:03:29)

    我转过比你小的胰岛素，用的bio-rad湿转，100v,1.5h,效果很好。

  • IAM007 (2014-4-12 09:03:47)

    这个你要是湿转的话,我用的是恒流的,200MA,25MIN
    效果非常好,只要你的抗体没有问题.用的是Bio-rad 的仪器.

  • fei1226com (2014-4-12 09:04:04)

    湿转80v至100v转2H足亦

  • one (2014-4-12 09:04:21)

    我觉得小分子western blot的关键还是选择合适的膜， NC的话选孔径小点的，时间不要太长。

  • 101010 (2014-4-12 09:04:42)


    我用pierce公司的PVDF膜，50v，30min。但是抗体最好买来就做，时间久了就不好做了

  • wsll (2014-4-12 09:05:00)

    请问一抗按要求保存的话最长能放置多久？

  • birdfish (2014-4-12 09:06:39)

    一般抗体分装后-20度保存3个月没有问题的。
    鉴于你的小分子量蛋白，建议用小孔的PVDF膜，1.5 MM？ 我以前做过，记不太清楚了。湿转转膜的时间你得自己摸一下条件，建议先试一下 100 mA, 2hr.
    一般说来，转膜恒定电流比较好，这样时间也会比较恒定。而且理论上说，电流相对小一些，也会比较好。当然，电流越小，所需时间也越长。

  • bamboo16 (2014-4-12 09:07:13)

    问楼上同志:胰岛素的分子量很小,能请教您电泳是怎么做的吗?不胜感激,我最近要做胰岛素的电泳实验,正急着不知道怎么办?
查看全部回复 我也来说两句
查看完整回复请点击这里：
【求助】小分子蛋白的westonblot