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【求助】为何用硫酸铵沉淀蛋白质沉淀物漂浮在上面?
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用硫酸铵沉淀蛋白质沉淀物漂浮在上面,而不沉淀在管底,是何原因?有人说T-80有可能干扰蛋白质沉淀,T-80是什么东东?谢谢!
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-4-13 00:00 作者: sunbent 来源: 分析测试百科网
最新回复
lorri (2014-4-13 00:01:10)
Maybe the desity of target protein is lighter than ammonia sulfate solution
zhenxin (2014-4-13 00:01:30)
是不是蛋白阿,浮在上面的?
shenkunjie (2014-4-13 00:01:51)
是不是白色的泡末呢,可能搅拌得过快了
daod (2014-4-13 00:02:10)
都没有说道重点,楼主问的T-80就是Tween-80.这类表面活性剂是干扰硫酸铵沉淀的效果,需要先去掉它或降低它的浓度到cmc以下才可以有好的沉淀效果。
woshituzhu (2014-4-13 00:02:42)
我的实验中也有这种现象出现,但是看文章中漂浮在上面的也有可能是目的蛋白
zhy平平 (2014-4-13 00:03:02)
dodoit (2014-4-13 00:03:46)
那是脂蛋白,因为硫酸铵的浓度太高,造成低密度的成分悬浮。解决方法有二:1 采用分级沉淀法,先用30%硫酸铵沉淀,再调到你用的沉淀浓度,一般就能解决你的问题了;2 要用超速离心机,离心速度至少1万转以上,蛋白也会全凝集在底部。
同意上述观点
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