【求助】WESTERN BLOTTING 转膜过程中太热会...

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• am10 (2014-4-17 14:33:35)

  冰浴，搞冰不方便的话也起码凉水浴一下
  这个结果不是很好实在太笼统，等于什么都没说，建议先参考一下这里的wb相关主题吧

• glass (2014-4-17 14:34:00)

  过热，可能是你的Transfer buffer中盐的浓度太高了，建议用低盐的buffer。
  也可以低电流，长时间转膜。
  同意楼上的，冰浴也是一个好方法。

• BOSS2011 (2014-4-17 14:34:24)

  
  过热的话肯定会造成蛋白质降解啊，我们常常是将transfer buffer提前一天配制好放到4度冰箱预冷，转膜的时候将转膜仪也放到4度，这样液体就不至于太热了呵呵
  另外我见到北京六一的一个转膜仪带着冷却装置：即有两个胶皮管一个连接水龙头进水，一个是出水，转膜过程中流动的自来水可以将产生的热量及时带走，这样也起到了降温的作用，打听了一下六一公司好像500大洋，只是不知道质量怎样。

• shenkunjie (2014-4-17 14:34:50)

  
  看你的帖子你好像是湿转了！这个我以前也作过高电流会使transfer buffer过热的造成蛋白质降解！我把转移装置放到了冰盒里周围用冰块填满！你可要有点耐心十几分钟就填一点冰！我是转了两个小时就ok了 。我想你的也应该没问题 ！祝试验顺利！

• am10 (2014-4-17 14:35:09)

  
  转膜时间要看分子量而定吧
  其实我觉得也不一定要不断加冰，简单用一盘水泡着转移装置，就热不到哪里去了
  不过以前我也经常过热，因为电源只能衡压，不能衡流，过夜电泳的话，电流总是不断的升，不过好像做wb的结果也还可以

• DNA (2014-4-17 14:35:29)

  
  谢谢各位了！
  我是用的冰浴，而且也是在冰箱里。
  可是做出来就是没有满意的结果！郁闷中~~~~
  再摸索吧！

• 了了 (2014-4-17 14:35:47)

  
  Bio-Rad公司的转膜槽有配冰盒的呀，干吗不用呢，中途换一次冰盒不就解决了？

• birdfish (2014-4-17 14:36:20)

  用Bio-Rad公司的冰盒，转膜槽外面再加一些冰，就可以达到降温的目的了。我们这样做效果很好的。