【求助】SDS-PAGE跑起来不成直线,该如何解决?

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• remenb (2014-4-17 14:56:19)

  加电泳缓冲液时去掉玻璃板下的气泡，及时更换新的电泳缓冲液，试试我想应该有效

• avi317 (2014-4-17 14:56:53)

  
  前面电压是不是太低了,我们一般是70-90V跑半个小时左右,,,然后我觉得和缓冲液有关,换个新的缓冲液试试,祝你好运

• #甜# (2014-4-17 14:57:38)

  我新配的缓冲液，今天跑的也不成直线。而且，我一开始用60V的电压，不到15分钟样品就跑出浓缩胶了，真是恐怖啊，请教各位这是怎么回事？

• leifengta (2014-4-17 14:58:06)

  
  缓冲液配方？
  用的是1*的浓度吗？好好检查一下
  我们用六一场的电泳槽，都是160V跑到底，到溴酚蓝出下缘，一共也就跑一个来小时，倒是真没注意浓缩胶能跑多久
  每孔的上样体积有多大，3mm×1.5mm的上样孔，上到30－40ul样品的话，很难跑成直线
  再就是可以看看两片玻璃板是不是严密帖合了，如果边缘漏的话，电流从侧边走出也走不成直线
  楼上也有战友说排走气泡的问题，可以往电泳槽里加1/4体积电泳液，然后倾斜放入，胶下的气泡就被赶出来了

• huifeng0516 (2014-4-17 14:58:23)

  如果有可能，尽量不用两边的孔跑样品，因为即使不存在其他原因，也会由于边缘效应，导致两边的孔跑的和中间的孔不一样。所以两边的孔一般都只上等量上样buffer就可以了。还有你的上样buffer是不是有问题。
  气泡是很重要的，一定要排出，否则的话那不一定是什么样子的了。
  不知道你的电泳槽限制最高电压是多少，在浓缩胶里面一般60V左右，分离胶100－120V。跑一个电泳下来3个小时左右，。wfayew你们跑的好快呀，^_^。我们用的电泳槽最大电压140V。

• wmp1234 (2014-4-17 14:58:46)

  我12％的胶，一直用45V跑的，效果非常的好，你可以实验一下。

• jkobn (2014-4-17 14:59:04)

  
  呵呵，我一看就知道是电泳仪的问题。当然，前提是排除槽子没有问题。
  我过去用的电泳仪也是不正，自从换了电泳仪，就正了。
  为了避嫌，我不讲电泳仪的厂家，呵呵。

• jkobn (2014-4-17 14:59:28)

  
  我换了电泳仪后也没有了边缘效应，呵呵！
  声明，绝对不是广告