孔雀石绿的背景资料及检测现状

一、背景资料
    孔雀石绿 （Malachite green）别名　碱性绿　盐基块绿 孔雀绿 苯胺绿、维多利亚绿或中国绿，生物染色剂、染料，商品名有草酸盐和氯化锌两种规格，以前渔业上用的常为前者。
    孔雀石绿为翠绿色有光泽的结晶，属三苯甲烷类染料。化学名称为四甲基代二氨基三苯甲烷；分子式：C23H25CIN2，结构式见图A1。易溶于水、乙醇和甲醇，水溶液呈兰绿色。其在水生生物体中的主要代谢产物为无色孔雀石绿(结构式见图A2)，无色孔雀石绿由于其不溶于水，残留毒性比孔雀石绿更强。孔雀石绿的抗菌杀虫机理是：孔雀石绿在细胞分裂时阻碍蛋白肽的形成，使细胞内的氨基酸无法转化为蛋白肽，细胞分裂受到抑制，从而产生抗菌杀虫作用。
    孔雀石绿过去常被用于制陶业、纺织业、皮革业、食品颜色剂和细胞化学染色剂，1933年起其作为驱虫剂、杀虫剂、防腐剂在水产中使用，后曾被广泛用于预防与治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病。
    从上世纪90年代开始，国内外学者陆续发现，孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿具有高毒素、高残留、高致癌和高致畸、致突变等副作用。
    孔雀石绿能引起鱼类的鳃和皮肤上皮细胞轻度炎症；使肾管腔有轻度扩张，肾小管壁细胞的胞核也扩大；更重要的是影响鱼肠中的酶，使酶的分泌量减少，从而影响鱼的摄食及生长。
    近年来的研究发现，孔雀石绿特别是其代谢物在水产体内有明显的残留现象，其残留时间达到100天以上，鉴于孔雀石绿的危害性，国外一些发达国家早已宣布禁止其在经济鱼类（观赏鱼除外）养殖过程中使用。我国也于2002年5月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中，禁止用于所有食品动物。
二、事件回顾：
    《2000年度中国出口动物源性食品中有毒有害物质残留监控计划》首次将出口鳗鱼中孔雀石绿残留量的监控列入年度计划，并延续至今。2002年5月欧盟就曾向我国通报在2批浙江舟山向德国出口鳗鱼中检出孔雀石绿。
从英国的食品安全警报  到国内相继发现孔雀石绿
    2005年6月5日，英国食品标准局在英国一家知名的超市连锁店出售的鲑鱼体内发现一种名为“孔雀石绿”的成分，有关方面将此事迅速通报给欧洲国家所有的食品安全机构，发出了继“苏丹红1号”、“对位红”之后的又一食品安全警报。英国食品标准局发布消息说，孔雀石绿是一种对人体有极大副作用的化学制剂，任何鱼类都不允许含有此类物质，并且这种化学物质不应该出现在任何食品中。
    没过多久，国内就有媒体报道，在国内很多地方，尤其是河南、湖北等地的水产养殖和水产品运输过程中，孔雀石绿仍在被普遍使用。重庆市执法部门在某水产交易市场查获600多只含有孔雀石绿的甲鱼。有些地区则在鳗鱼制品中检出孔雀石绿。农业部办公厅于2005年7月7日发布了《关于组织查处“孔雀石绿”等禁用兽药的紧急通知》，要求各地尽快组织开展孔雀石绿等禁用药物的专项整治工作。农业部渔业局马上组织调查组奔赴各地调查孔雀石绿问题，并组织专家商讨对策。
     今年以来欧盟、日本、韩国等国对我出口鳗鱼中孔雀石绿残留问题加大了检验力度，今年以来，以上三国检出我出口鳗鱼中孔雀石绿残留XX批。日本也因此从今年7月1日起，开始对来自我国的鳗鱼产品强制检测孔雀石绿。本月，中国国家质检总局在收到国外发现福建、江西等省份出口的鳗鱼和鳗鱼产品被验出含有“孔雀石绿”后，发出紧急通知，首次下令全面回收全国出口、在赴运途中，或滞留国内外通关口的烤鳗等鳗鱼制品。与此同时，香港新加坡等也加强了检验，检出了多批大陆水产品含有孔雀石绿残留。
三、检测方法
     目前，国外已建立的检测方法主要采用了气相色谱质谱联用法、高效液相色谱法和液质联用法。国内的标准目前已有农业部《无公害食品水产品中孔雀石绿残留量的测定液相色谱法》SC　T3021－2004和出入境检验检疫标准SN/T1479-2004“水产品中孔雀石绿残留量的测定方法”，2004-11-17发布，2005-04-01实施。这两种方法大同小异，基本抄袭美国J. AOAC Int. 1995，78（6）： 1388-1393（Optimization of a liquid chromatographic method for determination of malachite green and its metabolites in fish tissues）。
    出入境方法简介：鱼体中残留的孔雀石绿和隐色孔雀石绿在酸性介质下用乙腈提取，经液液分配后，通过丙磺酸固相萃取小柱净化，用流动相和盐酸羟胺甲醇溶液洗脱收集后，在氰基液相色谱柱上分离，同时将分离的隐性孔雀石绿经氧化铅衍生柱转化为母体，用可见光检测器在618nm处测定吸光度，外标法定量，样品中孔雀石绿的残留量以母体及其代谢物总量计。 测定低限为2μg/Kg。
    两种方法有所不同的是出入境方法基本是原汁原味的美国方法，只增加了LC-MS-MS(TOF)确证方法。但确证方法仍使用PbO衍生柱，有画蛇添足之嫌。农业部方法在前处理的称样量、试剂量等细节上做了一些改动，色谱分离使用的是通用的C18，没有用原文的氰基柱，也无确证方法。这两种方法均可同时检测孔雀石绿和无色孔雀石绿残留。

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