【求助】请问用透析袋进行透析一般需要多长时间啊？

最新回复

• 3N4G (2014-5-10 17:35:21)

  
  透析一般需要2hr,透析3次就充分了

• huifeng0516 (2014-5-10 17:35:40)

  
  我一般是下午5点左右开始做透析，开始2h每隔30min就换水，然后每隔1h-1.5h换次水，然后临走之前换一次过夜，感觉保险一些
  不过理论上是换3次就应该够了，每次2h，基本上问题也不大
  个人意见，供参考！
  祝好运！

• ffaa (2014-5-10 17:35:59)

  
  看你要透多少了,我经常透析500ml，配2个5升的透析液，一般下午3点左右透晚上9点多换透析液到第2天8点多。还要预先预冷

• zhezhe (2014-5-10 17:36:16)

  我记得静止透析是overnight
  不断搅拌的话是2-3 h达到平衡。

• junjie05 (2014-5-10 17:36:34)

  不过overnight 最好也change buffer 3 times

• gemei0115 (2014-5-10 17:36:54)

  呵呵，前天做了透析，搅拌速度不是很高，打在2档（应该是每分钟200么？没测）。2.5 h达到平衡了。是通过测蛋白溶液和透析液的conductivity知道的。
  我在想下面的因素应该对平衡时间有影响：
  1. 透析袋的COWM的大小，比如10 kD的和30 kD的应该不一样吧？后者应该更快；
  2. 搅拌速度（或者静止）；
  3. 透析温度？如果是复性，我可能选择室温；否则我选择4度。温度应该有影响，但影响有多大？有人做过实验么
  当然我想3h的搅拌应该就OK了
  供大家讨论一下

• KGZ564 (2014-5-10 17:37:10)

  
  不知道你的蛋白的等电点是多少？如果等电点在7左右，你用去离子水透析时会沉淀在透析膜里。
  透析一般先用去离子水短时间透析，去除盐等物质，后面用缓冲液透析。透析介质的体积在样本体积的50倍以上。

• junjie05 (2014-5-10 17:37:35)

  
  我是每三小时透析一次！

• whitesheep (2014-5-10 17:37:52)

  我想问一下，我的融合蛋白进行透析复性（15 ｍＬ），用的是PH7.3的PBS缓冲液，透析48h,一天大概换四次液，每次１０００ｍL 的缓冲液，但到最后蛋白就会凝聚出现沉淀。我的蛋白疏水性有些强，是不是由于透析时间过长啊。透析的蛋白要用来免疫和亲和层析柱纯化。