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【求助】非变形胶的蛋白跑哪里去了
好郁闷啊,以前跑了一个5KD的蛋白,用SDS-WESTERN,结果条带出来了,但是不是太清楚,自从换成非变形胶就不出东西,胶上好光哦,瞪大眼睛也找不到一点蛋白条带,恨不得用放大镜看了!!!!我就是把SDS去掉了,其他都没变化,胶的浓度还是用的16.5%的,为什么啊?求各位师兄师姐好心帮帮我吧!【求助】非变形胶的蛋白跑哪里去了
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【求助】非变形胶的蛋白跑哪里去了
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-5-12 17:38 作者: utt0989 来源: 分析测试百科网
最新回复
987789 (2014-5-12 17:39:13)
你的蛋白质等电点是多少，会不会去掉SDS后，蛋白没有带负电荷而不往阳极泳动？
如果是这样，你应该将蛋白从阳极向阴极跑！！
pengke1983 (2014-5-12 17:39:38)
orangecake (2014-5-12 17:40:06)
呵呵，非变性凝胶并不是简单的把SDS去掉的，
我作EMSA常用的是连续性的非变性凝胶！
成分有10*TBE,50%甘油，40%Acr/Bis,TEMED,10%APS
utt0989 (2014-5-12 17:40:38)
我的蛋白等点电是5.31 应该不会往阴极跑吧?但是别人都跟我说就是简单把SDS去掉就OK了 可我跑了2次都失败!
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