【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗


我的蛋白知道氨基酸序列,打了质谱,分子量比在Expasy上算出来的大了378.7D,请问这个结果可信吗,是我的蛋白吗?

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  • 雪花子 (2014-5-17 16:24:34)


    补充一下,蛋白的理论值是:18377.5
    质谱的结果是: 18756.2
  • taoshengyijiu (2014-5-17 16:24:55)


    蛋白纯度如何,有可能是其它蛋白的信号,建议从质谱的原始信号,做分析。
  • xevin (2014-5-17 16:25:17)


    可信的,如果你要求分子量更精确点,建议加入内标校正一下,最少加两个,就是你目标分子量附近的选2-3个标准蛋白做内参.
  • 雪花子 (2014-5-17 16:25:37)

    我不知道蛋白的纯度怎么看,电泳跑胶的时候没见杂带。
    我做的是MALDI-TOF,请问这对样品纯度的要求高吗?
  • daod (2014-5-17 16:25:54)


    电泳跑胶的时候没见杂带并不能保证足够纯,另外,如果你的蛋白是糖蛋白,理论值可能因为没计糖基而偏低
  • nn255 (2014-5-17 16:27:37)

    这个结果在误差范围内,差异的原因可能与质朴本身有关,也与你的蛋白纯度,糖基化情况有关。如果你的蛋白是表达的,差异会更大。
  • 雪花子 (2014-5-17 16:27:59)


    我的蛋白是大肠杆菌表达出来的。
    原核表达会有糖基化修饰吗?
    电泳跑胶没有杂带,即使不是足够纯,大概纯度能达到多少(%)?
  • gogo (2014-5-17 16:28:16)


    什么载体? 一般只会相差个位数啊