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【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗
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发表于: 2014-5-17 16:24 作者: 雪花子 来源: 分析测试百科网
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【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗
我的蛋白知道氨基酸序列,打了质谱,分子量比在Expasy上算出来的大了378.7D,请问这个结果可信吗,是我的蛋白吗?
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【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗
我也来说两句
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最新回复
雪花子
(2014-5-17 16:24:34)
补充一下,蛋白的理论值是:18377.5
质谱的结果是: 18756.2
taoshengyijiu
(2014-5-17 16:24:55)
蛋白纯度如何,有可能是其它蛋白的信号,建议从质谱的原始信号,做分析。
xevin
(2014-5-17 16:25:17)
可信的,如果你要求分子量更精确点,建议加入内标校正一下,最少加两个,就是你目标分子量附近的选2-3个标准蛋白做内参.
雪花子
(2014-5-17 16:25:37)
我不知道蛋白的纯度怎么看,电泳跑胶的时候没见杂带。
我做的是MALDI-TOF,请问这对样品纯度的要求高吗?
daod
(2014-5-17 16:25:54)
电泳跑胶的时候没见杂带并不能保证足够纯,另外,如果你的蛋白是糖蛋白,理论值可能因为没计糖基而偏低
nn255
(2014-5-17 16:27:37)
这个结果在误差范围内,差异的原因可能与质朴本身有关,也与你的蛋白纯度,糖基化情况有关。如果你的蛋白是表达的,差异会更大。
雪花子
(2014-5-17 16:27:59)
我的蛋白是大肠杆菌表达出来的。
原核表达会有糖基化修饰吗?
电泳跑胶没有杂带,即使不是足够纯,大概纯度能达到多少(%)?
gogo
(2014-5-17 16:28:16)
什么载体? 一般只会相差个位数啊
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【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗
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雪花子 (2014-5-17 16:24:34)
补充一下,蛋白的理论值是:18377.5
质谱的结果是: 18756.2
taoshengyijiu (2014-5-17 16:24:55)
蛋白纯度如何,有可能是其它蛋白的信号,建议从质谱的原始信号,做分析。
xevin (2014-5-17 16:25:17)
可信的,如果你要求分子量更精确点,建议加入内标校正一下,最少加两个,就是你目标分子量附近的选2-3个标准蛋白做内参.
雪花子 (2014-5-17 16:25:37)
我做的是MALDI-TOF,请问这对样品纯度的要求高吗?
daod (2014-5-17 16:25:54)
电泳跑胶的时候没见杂带并不能保证足够纯,另外,如果你的蛋白是糖蛋白,理论值可能因为没计糖基而偏低
nn255 (2014-5-17 16:27:37)
雪花子 (2014-5-17 16:27:59)
我的蛋白是大肠杆菌表达出来的。
原核表达会有糖基化修饰吗?
电泳跑胶没有杂带,即使不是足够纯,大概纯度能达到多少(%)?
gogo (2014-5-17 16:28:16)
什么载体? 一般只会相差个位数啊
【求助】质谱比理论值搭大了378.7D,结果可信吗