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【求助】请教SDS-PAGE浓缩胶的问题
【求助】请教SDS-PAGE浓缩胶的问题
我是PAGE新手,在做PAGE之初遇到很多问题,比如说漏胶等等,现在遇到一个问题,怎么想也想不明白,就是加浓缩胶之后,缓慢将梳子轻轻插入,再把孔填满之后,过一会液面就开始下降,等到胶聚合好之后,孔就变得很难看,不均匀,我很是苦恼,请教各位前辈指点指点
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【求助】请教SDS-PAGE浓缩胶的问题
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-5-20 17:28 作者: 68943512yao 来源: 分析测试百科网
最新回复
summerxx (2014-5-20 17:30:59)
这个有时候会有遇到
不过齿短一点也不是大问题。实在不行可以再做一次压缩胶从缝里用枪加入
至于原因可能是上面的胶条两边没封好,有时候是胶条被长期拉伸导致上面部分薄了点
可以置于37度快速凝固也会减少液面的下降
831226 (2014-5-20 17:31:17)
This is technique problem. Every time, i also meet this problem, my experience is to place whole gel into buffer, and wait untill you want to load sample to put out combs.
tuuu2 (2014-5-20 17:31:37)
胶下降问题:正常情况下,凝胶会导致体积些许变小,会稍有下降,但不会很厉害!
孔比较难堪:凝胶放置时间过长,会导致胶粘在梳子上,把梳子时可能会把胶拉变形,另外,把梳子时两只手用力不均也会出现类似情况。如出现类似情况,你用注射器针头把它重新摆正便是,不会有影响的。
3648755 (2014-5-20 17:31:58)
梳子插好后
应该起到让胶和空气隔离的作用
没有隔离的胶面会下降的很严重
zsxan1990 (2014-5-20 17:32:13)
那是 你浓缩胶凝的慢了。可以酌情再加点AP和temed,胶凝的快情况就好些,一般我做的话,凝的慢了是要补几次胶。
yonger (2014-5-20 17:32:32)
要补胶的,胶凝固的时候体积会缩小一点点。每隔一段时间补充一点就好了。
fei1226com (2014-5-20 17:32:54)
你看看是不是你的过硫酸胺过期了,检测方法是将其溶解后,放在耳边会听见霹雳啪啦的声音。
shenkunjie (2014-5-20 17:33:17)
你看看是不是你的过硫酸胺过期了,检测方法是将其溶解后,放在耳边会听见霹雳啪啦的声音。
nn255 (2014-5-20 17:33:40)
QUOTE:
这个检测方法不行,我曾经就遇到过,有声音,还挺响,但胶就是凝不上。nn255 (2014-5-20 17:34:04)
QUOTE:
建议,加大APS的量,加快凝胶速度,同时,凝胶温度不可过高,力争做到低温快凝胶,这样胶就不会缩的太多。【求助】请教SDS-PAGE浓缩胶的问题