【求助】请问his-tag融合蛋白的纯化和检测

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-5-20 17:59 作者: caihong 来源: 分析测试百科网

看到有些his protein purification system 是用来从E.coli中纯化his蛋白的，如promege的
就是说原核表达的his 蛋白和真核表达的his蛋白需要不同的纯化kit吗？
另外，his抗体的二抗选用什么好啊？

dog002 (2014-5-20 18:00:04)

一样,无所谓什么纯化系统,大多都用镍柱,未必一定用试剂盒,但是如果是包涵体的当然需要变性条件下去纯化.
caihong (2014-5-20 18:01:15)

刚接触做蛋白实验，很多都不懂-_____-
谢谢回复。
我对用抗体检测还是不明白，针对his-tag的蛋白，需要买一个his的一抗，还有二抗，还有显色液，对吗？
这些试剂买什么公司的好呢？
966735obeng (2014-5-20 18:01:35)

我这里有纯化手册，但是超过上传大小的限制
“A handbook for high-level expression and purification of 6xHis-tagged proteins”
怎么给你呢？
966735obeng (2014-5-20 18:01:57)

文件大，因此拆分成几个小文件了！
用masterb splitter软件进行了拆分，同理可以用此软件组装！
下载masterb splitter地址：
cuturl('http://download.pchome.net/system/file/split/download_3577.html')