【求助】一抗如何重复利用

最新回复

• nut6694 (2014-5-23 15:32:18)

  
  我们的一抗是用5%non-fat milk稀释的，按照稀释比例配好，
  第一次回收了之后，加1:100 10%叠氮钠，放4C冰箱，反复利用，能用好多次呢。

• dog002 (2014-5-23 15:32:37)

  
  加1:100 10%叠氮钠，放4C冰箱
  太高了吧
  0.02%的就可以了

• 987789 (2014-5-23 15:32:59)

  QUOTE:

  原帖由 dog002 于 2014-5-23 15:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  加1:100 10%叠氮钠，放4C冰箱
  太高了吧
  0.02%的就可以了

  
  的确，太高，我们一般直接放冰箱，如果时间长，可以-20，反复使用的次数不宜太多，一般3-4次，不过这得看抗体的滴度，高者可用好多次。

• ritou1985 (2014-5-23 15:33:31)

  想重复利用，建议用1％BSA，加0.02％叠氮钠，可以重复利用三次以上，我们试过的，效果还不错，

• ritou1985 (2014-5-23 15:33:56)

  
  牛奶容易变质

• tuuu2 (2014-5-23 15:34:16)

  
  这个浓度绝对不高噢。
  稀释后的抗体溶液用0.1%叠氮钠是很合适的，
  我们所里一直这么做的，从没有过问题。而且都反复用好久，甚至有的一年半载的都还好。
  不要别人说能反复用几次就用几次，很多东西要经过自己实践检验的噢。

• panda王 (2014-5-23 15:34:33)

  
  不同牌子的单抗的质量本来就存在差别，还是需要自己摸索的。

• wood533 (2014-5-23 15:37:08)

  
  叠氮钠好象是HRP的Inhibitor吧,加了后面的结果就有问题了呀,不知道我说的对不对呀.大凡HRP相关的WB都不允许在前面的实验中加NaN3.

• ladyhuahua (2014-5-23 15:37:31)

  
  叠氮钠是HRP的Inhibitor,但是回收一抗后还要洗两三次膜再加二抗，就算残留了一点也早洗掉了。