【求助】SDS-PAGE的脱色问题

最新回复

• zhezhe (2014-5-29 16:59:52)

  
  直接使用5%乙醇+10%醋酸组成的脱色液脱色效果就很好了!!

• uaubc (2014-5-29 17:00:13)

  不行啊,最新情况,今天用5%乙醇+10%醋酸脱色,预染marker的大分子量条带也快不见了

• ukonptp (2014-5-29 17:00:34)

  QUOTE:

  原帖由 uaubc 于 2014-5-29 17:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  不行啊,最新情况,今天用5%乙醇+10%醋酸脱色,预染marker的大分子量条带也快不见了

  这个可能和染色有关，不知道你的染色液是不是新配制的，一般脱色不会有太大问题，用水其实都可以的。
  小分子条带不见了，有可能是弥散了，建议跑胶时间短点，染色时间长点。

• uaubc (2014-5-29 17:00:51)

  
  预染marker的小分子条带跑完胶还在的,脱色后就不见了.所以觉得是脱色的问题

• 大海啊故乡 (2014-5-29 17:01:12)

  
  可能没完全染色好，我们一般是室温染色半小时，然后脱色

• uaubc (2014-5-29 17:01:32)

  QUOTE:

  原帖由 大海啊故乡 于 2014-5-29 17:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  可能没完全染色好，我们一般是室温染色半小时，然后脱色

  过夜染色…………

• vcve (2014-5-29 17:01:52)

  
  如果分子很小的话就要先进行固定用固定液，这样可以防制小分子弥散！你的脱色没有问题，有问题的可能是染色液！
  固定液的配方：无水乙醇:乙酸：水＝2：2：6
  还有要看小分子蛋白，胶的浓度也要大一点！

• uaubc (2014-5-29 17:02:10)

  QUOTE:

  原帖由 vcve 于 2014-5-29 17:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  如果分子很小的话就要先进行固定用固定液，这样可以防制小分子弥散！你的脱色没有问题，有问题的可能是染色液！
  固定液的配方：无水乙醇:乙酸：水＝2：2：6
  还有要看小分子蛋白，胶的浓度也要大一点！ ...

  可是我以前都可以染出小分子量的条带的啊

• 子衿青青 (2014-5-29 17:02:28)

  看看染色液是否时间长了？重新配置染色液、固定液、脱色液，再看看结果如何吧

• kuohao17 (2014-5-29 17:02:45)

  
  我们用的是10%甲醇+10%冰醋酸（只用这种配方一次脱色），建议你注意一下甲醇和冰醋酸的质量，比如生产产家是否正规、生产日期是否较新。变质的试剂也有可能导致脱色过快。

• pulala (2014-5-29 17:03:02)

  我用的30%的乙醇，7% 的冰醋酸
  脱色效果一直不错

• tudou85 (2014-5-29 17:06:54)

  
  脱色液的配方有很多，我觉得大家的都可能很好，主要先配制点新的看看吧，包括电泳其他的试剂，也不是很麻烦。相信很快就可以解决的。

• zranqi_1 (2014-5-29 17:07:16)

  直接用快染液吧，效果不错，价格也便宜。

• is2011 (2014-5-29 17:07:38)

  是不是染液的问题啊！染液重复使用易受SDS的污染，这种情况下胶染色会变差，建议新配点染液试试。

• HPLC使者 (2014-5-29 17:07:55)

  
  建议采用0.25M~0.5M的氯化钠溶液脱色！效果好！背景清晰！
  染色液中的考250含量可以加倍，染色半小时即可！