【求助】纯化蛋白怎么灭菌?

最新回复

• u234 (2014-5-31 09:38:28)

  
  你的蛋白浓度怎样？体积很小么？有多少ul?

• yapuyapu (2014-5-31 09:38:51)

  可是怎么知道蛋白分子合适的膜孔径呢?蛋白可能是聚成团的呀!

• windy+++ (2014-5-31 09:39:42)

  
  1 用0.45um的滤膜过滤除菌
  2 检测一下你的蛋白的热稳定性，如果好的话可以进行灭菌处理，简单的就行，100水浴10min一般就没问题，我们做的芽孢杆菌提取抗菌肽，肽的稳定性很好，这样灭菌效果很理想。

• windboy (2014-5-31 09:40:08)

  
  可以用 millipore 公司的 ultrafree-MC ，可以过滤灭菌 0.5 ml 以下的体积，2，3十微升都可以。
  这种膜怎么现在能买到吗,how much?我胡蛋白可只有lml.

• IAM007 (2014-5-31 09:41:17)

  
  膜可是很容易吸附蛋白的~~~最好了解好了这个问题。

• avi317 (2014-5-31 09:41:56)

  QUOTE:

  原帖由 kent 于 2014-5-31 09:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  可以用 millipore 公司的 ultrafree-MC ，可以过滤灭菌 0.5 ml 以下的体积，2，3十微升都可以。

  1ml的体积可不算小，你的蛋白浓度多少？只要浓度不要太低，很多公司的低吸附亲水滤膜都可以达到目的。
  你的体积可以使用无菌包装的25mm 0.22u针头滤器，几块钱一个，millipore, sartorius, Pall都有。可以在超静台里无菌操作。基本不会有体积损失。
  有些小肽可能热稳定性好，其余蛋白还是不要考虑autoclave了。
  如果蛋白聚集，但仍是可溶的，是不会被滤膜截留的；如果截留，说明你的蛋白已经沉淀了，估计连活性也没有了。

• linlinstar (2014-5-31 09:42:17)

  
  目前吸附最低的膜材质要数PVDF的了
  亲水性的纤维素膜也可
  吸附最多的要数PES
  如果浓度高，吸附就不那么明显；否则可能损失很大。