最新更新主题

月度关注热点

【求助】我的电泳胶请指教

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-5-31 13:09    作者: pengke1983    来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】我的电泳胶请指教

这是我前段时间跑的SDS-PAGE胶，用的是7.5%，最左边的是MARKER ，从右向左是我对蛋白提取的每步，分别是粗酶- 离子柱 -凝胶柱 ，将每步的样品在电泳图跑过后发现离子柱和凝胶柱的样品跑不下来，而且在脱色过程中时间长了（5个小时左右），颜色会被脱没有了，请问各位大侠认为是什么原因呢？？之前我想可能是盐浓度高的原因吗？？？敬请指教~~
查看完整版本请点击这里：
【求助】我的电泳胶请指教


62185492.jpg


我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • JK.jon (2014-5-31 13:09:49)

    既然过了凝胶柱，不大可能是盐浓度问题，你用什么浓缩蛋白的？聚乙二醇吗？

  • pengke1983 (2014-5-31 13:10:16)

    对啊，粗酶用的是冻干浓缩的，但是过柱子的样品都是聚乙二醇浓缩的，用的是20000的，透析袋是14000的，会污染吗 ？盐浓度单独看是不大的，但是我想如果浓缩了以后 会不会变大呢？同时，谢谢楼上的朋友给与的指教~

  • jkobn (2014-5-31 13:10:32)


    聚乙二醇浓缩不会影响盐浓度。
    样品中有聚乙二醇会影响电泳带。
    透析后再跑电泳。

  • pengke1983 (2014-5-31 13:10:51)


    恩呢，看看吧，准备再做得时候好好透析下，郁闷啊，又要重新做啦，谢谢大虾们哦

  • BOSS2011 (2014-5-31 13:11:10)


    ^_^，不知道我说的对否：染色前固定了吗？如果没有固定就染色、脱色，会有这种情况出现；电泳样品跑不下来可能是因为1、胶浓度大，可以降低胶浓度看看2、也可能是电极缓冲液使用次数过多影响的

  • glass (2014-5-31 13:11:29)

    你可以将收集样品透析降低盐浓度后用蔗糖浓缩，很快的，染色前先固定再染色脱色，这样需的时间也比较少。

  • wmp1234 (2014-5-31 13:11:45)


    请问楼上用蔗糖浓缩也是直接把透析袋放到蔗糖上浓缩吗？
查看全部回复 我也来说两句
查看完整回复请点击这里：
【求助】我的电泳胶请指教