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【求助】是否用TBP代替DTT？
【求助】是否用TBP代替DTT？
请问各位：
DTT和TBP都是还原剂，但是区别在于DTT带了负电荷而TBP不带，并且又说TBP的还原效果比DTT要好，所以有文献建议在泡胀液中用TBP来代替DTT，但是我想知道的是，既然如此，是否在蛋白质裂解液和平衡液1中都用DTTLAI 代替？谢谢！
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-7-02 16:39 作者: u234 来源: 分析测试百科网
最新回复
fsdd817 (2014-7-02 16:40:01)
关键在于它能否还原巯基。
还原巯基的试剂其实很多，常用巯基乙醇、DTT是因为比较便宜，效果又好。
jujuba (2014-7-02 16:40:24)
关于TBP和DTT的差异我也研究过一段时间
DTT带电荷所以可能会引起碱性端拖尾；
有专门做过DTT和TBP电泳图比较的认为,TBP可以得到更多的蛋白点；
但是TBP为剧毒，DTT比TBP安全的多；
关于TBP在室温下的半衰期问题值得研究；
个人认为，先用DTT试一下，如果效果可以的话，尽量不用TBP,毕竟DTT是经典配方嘛，也没人会有异议。
ritou1985 (2014-7-02 16:40:48)
是呀，我也正想问，以前我都是用DTT的，现在水化液和裂解液用了TBP，但是平衡液1还是用DTT，不知道可不可以，反正最近图出来纵横条纹都很多，不知道是什么原因，是否和这个有关，有哪位战友知道吗？
qhyu (2014-7-02 16:43:10)
这两种试剂我都用过，比较难取舍。TBP的效果确实比DTT好.但是TBP在室温下半衰期很短。所以一般不适合用被动泡涨。所以我现在一般都把这两个混合使用。
qhyu (2014-7-02 16:45:28)
这两种试剂我都用过，比较难取舍。TBP的效果确实比DTT好.但是TBP在室温下半衰期很短。所以一般不适合用被动泡涨。所以我现在一般都把这两个混合使用。
nn255 (2014-7-02 16:46:46)
我用的是胶条在HOLDER中泡涨上样,可以用你说的上面的方法吗,如果可以请告诉我具体放置滤纸的方法,谢谢!
qhyu (2014-7-02 16:49:01)
主动泡涨的时候，你加30伏的电压在泡涨过程中本身就是一个除盐的过程啊，所以就可以不加电极滤纸，等泡涨结束后在负极加一个有3ul 65mM DTT和5ul 纯水的滤纸就可以解决阴极漂移问题（不好意思，上面打错了，加DTT是解决阴极漂移的问题）。
nn255 (2014-7-02 16:49:50)
我在加完样之后就会直接在HOLDER中加入覆盖液,这样泡涨结束后怎么加带有DTT滤纸呢?请赐教
bamboo16 (2014-7-02 16:50:21)
主要是TBP毒性大，半衰期短。用肯定是可以用，但是没有DTT使用方便，当然你也可以选择还原性更好的试剂。
【求助】是否用TBP代替DTT？