【求助】小剂量蛋白样品如何浓缩

最新回复

• greenbee (2014-7-05 16:09:46)

  
  改用蔗糖即可。如果仅仅做电泳，用PEG浓缩后可以用乙醇沉淀蛋白，这样可以把PEG去掉。此外PEG分子要足够大，这样才进不去。

• BOSS2011 (2014-7-05 16:10:29)

  
  冷冻干燥吧

• lixi559 (2014-7-05 16:10:47)

  
  很简单，用透析管啊。有1ml的，加入后5000转左右离心，要注意别把溶液离心干了，保留到你需要的体积即可。还要注意离心管的分子截留量。

• moonlight45 (2014-7-05 16:11:05)

  
  超滤管吧
  Milipore或Satorius(可能是这么拼，中文是赛多利斯)
  体积一般有1～4、2～6、2～15ml等，截留分子量1、5、10、30kd等等
  价钱嘛，4ml等四五十一个，一包25、100；15ml的***十吧，一包10个
  使用方法可以查产品说明书，或《蛋白质技术手册》汪家政、范明主编，科学出版社出版（这本书讲的挺详细）

• yapuyapu (2014-7-05 16:12:01)

  能问一下透吸管价格如何在哪里能买到

• vcve (2014-7-05 16:12:18)

  超滤管吧
  Milipore或Satorius(可能是这么拼，中文是赛多利斯)
  体积一般有1～4、2～6、2～15ml等，截留分子量1、5、10、30kd等等
  价钱嘛，4ml等四五十一个，一包25、100；15ml的***十吧，一包10个
  使用方法可以查产品说明书，或《蛋白质技术手册》汪家政、范明主编，科学出版社出版（这本书讲的挺详细）

• yapuyapu (2014-7-05 16:12:35)

  哎呀,太贵了.如果能有其他节约点的方法就好了.

• qqq111 (2014-7-05 16:12:54)

  
  我试过小剂量蛋白浓缩，不过操作一定要很小心，蛋白容易漏出来。如果蛋白漏出来，损失很大。
  具体步骤如下，供参考：
  小体积样品的透析
  本方法能方便地透析10~100µl体积的样品。
  步骤：
  用木塞钻在0.5或1.5ml微量离心管的盖子上扎一个小孔，注意在盖子的内面不要留有粗糙的边缘（它将与透析膜接触）。
  将样品加入微量离心管中，在盖子的开口处盖上透析膜，并紧压上已钻孔的管盖。
  在台式离心机上将离心管翻转过来轻轻地离心一下，让样品与透析膜接触。
  将管子倒置淹没于透析液中，并将它固定以保持倒置及被淹没的状态。
  用弯嘴巴斯德吸管吹出管盖与膜之间所有的气泡，让透析膜与膜接触。
  搅拌透析液并在适宜的温度下透析至少数小时，
  取出微量离心管，稍加旋离下以回收样品。

• yapuyapu (2014-7-05 16:13:33)

  
  这样浓缩后的透析会不会让透析液大量进入Ependorf管，增加原本缩小了的体积，如果那样前面做的浓缩就白做了。

• mickeylin (2014-7-05 16:13:57)

  用密立博的超滤管
  或者冻干都可以
  不过冻干很费时间还有那个油味真要命