【求助】 养细胞的培养基是怎样配制的？

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• junhun (2014-8-01 11:06:54)

  一般情况下我们在配培养基的时候，各种成分是分开来的。 干粉溶解之后就单独过滤，-20度保存。血清则于无菌条件下分装，等用时再将过滤好的干粉溶液、血清、双抗混匀调节pH，然后重新过滤，这样做下来感觉费时费力，有没有更好的方法？

• junhun (2014-8-01 11:08:23)

  
  比如说我可不可以在一开始就把血清加入到干粉溶液中，然后调节pH过滤，分装，于-20度保存。 在用的时候，于超净工作台内加入双抗，直接使用？

• tie8 (2014-8-01 11:14:48)

  一般是先用干粉配！否则pH值等不会准确，而且不同的细胞使用的血清浓度也不相同。因此，先配DMEM液，按要求配好，然后过滤。 分装一般在-20度保存，拿出其中一瓶使用！ 用的时候加血清和双抗，以及各种添加剂即可。不必测pH值！当然有人加入血清后，再次过滤一遍，好处是杂质会更少一些（血清时间长了，会有少许蛋白沉淀，这时候可能会加到培养细胞中，导致视野模糊）。

• redbutterfly (2014-8-01 11:15:09)

  
  直接买配好的培养基就好了啊~

• glass (2014-8-01 11:15:37)

  一般是先用干粉配！否则pH值等不会准确，而且不同的细胞使用的血清浓度也不相同。因此，先配DMEM液，按要求配好，然后过滤。 分装一般在-20度保存，拿出其中一瓶使用！ 用的时候加血清和双抗，以及各种添加剂即 ...
  
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  -20℃保存啊？我都是4℃保存的，说明书上也是说4°的 不过血清是-20℃保存的

• windboy (2014-8-01 11:17:30)

  -20℃保存啊？我都是4℃保存的，说明书上也是说4°的 不过血清是-20℃保存的
  俺们实验室也基本是这样做的，然后培养基在4℃保存，分装好的血清一部分-20℃保存的，一部分在4℃保存.
  

• glass (2014-8-01 11:18:00)

  20℃保存啊？我都是4℃保存的，说明书上也是说4°的
  不过血清是-20℃保存的
  
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  恩，培养液4度保存就行，血清和酶需要负20度保存