【求助】流动相用0.1%磷酸时基线洗不平

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-8-15 16:08 作者: gmjghh 来源: 分析测试百科网

本人使用的是岛津的液相色谱，柱子是 InertSustain C18的柱子开始先把纯甲醇保护的柱子，0.1%磷酸水：甲醇=70：30洗脱，基线在2分钟左右以下子上去好高，接着很缓慢的下降，我洗了一小时还是再下降，只是下降的速度很慢很慢了，最后我直接上样品甲醇从30%一直洗脱到97%为止，用时85分钟在这过程中基线一直都是稳定的下降，在开始到结束基线下降幅度有将近30mAU 后来把磷酸换成醋酸基线就稳定了。想问下，到底是哪里出来问题

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【求助】流动相用0.1%磷酸时基线洗不平

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mingming0638 (2014-8-15 16:09:06)

波长多少，这个漂移好像也不算大。

既然调整流动相就没有问题了，还是怀疑一下流动相本身吧。
mingming0638 (2014-8-15 16:09:28)

梯度洗脱中，甲醇的量不断增加，那么就是磷酸的量不断减少。

基线的漂移情况和程序变化的趋势相同么？换一下磷酸实验看看？
耗子=== (2014-8-15 16:09:43)

磷酸浓度比较大，在柱子的耐受范围之内吗？
gmjghh (2014-8-15 16:10:03)

嗯，柱子的耐受ph是2-7.5 0.1%的磷酸我用精密PH试纸测了下差不多了2的样子，是否是因为太酸了呢，我现在改用0.5%的醋酸了，这个问题就没有了
gmjghh (2014-8-15 16:11:16)

QUOTE:
原帖由 mingming0638 于 2014-8-15 16:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
波长多少，这个漂移好像也不算大。

既然调整流动相就没有问题了，还是怀疑一下流动相本身吧。
检测的波长是285nm 柱子的耐受ph是2-7.5 0.1%的磷酸我用精密PH试纸测了下差不多了2的样子，是否是因为太酸了呢，我现在改用0.5%的醋酸了，这个问题就没有了
gmjghh (2014-8-15 16:11:38)

QUOTE:
原帖由 耗子=== 于 2014-8-15 16:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
磷酸浓度比较大，在柱子的耐受范围之内吗？
是否超过那个耐受范围或者接近的话就会出现这样的情况？现在实验改用0.5%的醋酸了，基线很正常了
zwsyrt (2014-8-15 16:12:08)

估计是ph值问题吧 C-18柱子的值在2.0-8比较好
3N4G (2014-8-15 16:12:27)

是因为磷酸的酸性太强，可能超出了色谱柱pH使用范围。
youyou99 (2014-8-15 16:12:49)

是你的流动相酸性太强了，需要长时间的稳定时间。我以前也遇到过。
lixi559 (2014-8-15 16:13:06)

楼主所说十有八九是PH值得问题流动相的PH 值不在柱子的PH值范围内要么就是在柱子范围的边缘希望对你有用