生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧

xevin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76455
精华 0
积分 799
帖子 1176
信誉分 101
可用分 6807
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
1

发表于 2014-8-28 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧


跟一个老师聊天，讲到了FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒，而试剂盒的开发主要有两种方案，一种是将空细胞按照已定的生产工艺进行发酵和纯化，然后将获得的东西免疫动物制备抗体。还有一种就是将工艺获得原液去除抗体后再免疫动物，好像目前做这个工作的公司只有一家。感觉着两种方法理论可行，实际上操作很难，要做多少才能收集足够多的样品来做抗原呢？
不知各位业界资深专家有何看法？
顶部
wood533[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76132
精华 0
积分 863
帖子 1385
信誉分 100
可用分 7745
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
2

发表于 2014-8-28 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同关注。不过话说，现在国际上有能力自己开发宿主蛋白的检测试剂盒的，也就那寥寥几家吧
顶部
zzzz[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74598
精华 1
积分 656
帖子 967
信誉分 102
可用分 5638
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
3

发表于 2014-8-28 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这不用自己开发吧，一般只要你用的宿主细胞不是太另类，都应该可以买到商业化的吧
顶部
dodoit[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114479
精华 1
积分 340
帖子 377
信誉分 101
可用分 2624
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
4

发表于 2014-8-28 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从重组蛋白开始，国内一直都用商业化试剂盒，没听说还要自己做的。如果这样搞，又得加一层验证工序，不太靠谱吧
顶部
zwsyrt[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79787
精华 0
积分 594
帖子 867
信誉分 100
可用分 5136
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态 离线
5

发表于 2014-8-28 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的
顶部
xevin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76455
精华 0
积分 799
帖子 1176
信誉分 101
可用分 6807
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
6

发表于 2014-8-28 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

前期可以用商业化试剂盒的，临床三期的时候就需要自己的试剂盒了，因为基本上那个时候生产工艺已经确定了吧。
顶部
ending[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
7

发表于 2014-8-28 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

昨天也听说这个了，自己制备抗体挺困难的，企业难度又加大了
顶部
TNT[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75639
精华 0
积分 455
帖子 610
信誉分 100
可用分 3826
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
8

发表于 2014-8-28 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉要将原液中的抗体完全去除很难？再说谁又能保证在去除过程中，不会去除部分性质想似的宿主蛋白？前一个问题会导致所制备的宿主蛋白抗体可能存在一定的交叉反应（与目标单抗发生反应）；而后一个问题可能就会导致所制备的抗体不会识别部分宿主蛋白。对了，我也想问一个问题，表达细胞与空细胞之间的宿主蛋白（胞内或胞外上清）差异大吗？如差异小，是不是可以接受楼主所说的第一种方法用空细胞。如差异大，是不是意味着只能选择表达细胞呢？如何评价，如何选择？还得请楼主给点指示，谢谢
顶部
101010[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75120
精华 0
积分 517
帖子 734
信誉分 100
可用分 4490
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
9

发表于 2014-8-28 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的

==========================================================================================================

“2D LC-MS 来测HCP”，目前还不是FDA, ICH推荐/要求的技术，但是安进已经多篇文章发表了，我恰好最近也在关注这方面的问题，ELISA测HCP目前是主流方法，但是该方法也有一些缺点。但是LC-MS测HCP, 成本高，技术本身难度大的多，也更复杂，所以在企业普及，即使是在欧美，我估计也需要相当长的时间。
顶部
101010[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75120
精华 0
积分 517
帖子 734
信誉分 100
可用分 4490
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
10

发表于 2014-8-28 18:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
跟一个老师聊天，讲到了FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒，而试剂盒的开发主要有两种方案，一种是将空细胞按照已定的生产工艺进行发酵和纯化，然后将获得的东西免疫动物制备抗体。还有一种就是将工艺获得原液去除抗体后再免疫动物，好像目前做这个工作的公司只有一家。感觉着两种方法理论可行，实际上操作很难，要做多少才能收集足够多的样品来做抗原呢？
不知各位业界资深专家有何看法？

==========================================================================================================

这个要求，我目前还没有看到，FDA官方网站有相关文件吗？即使是”FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒“，企业自己也完全可以外包到CRO公司做，难度并不是太大。特向楼主介绍一篇GEN上的一篇很好的相关文章：Developing Antibodies for Detection of Host Cell Protein Contaminants,
cuturl('http://www.genengnews.com/gen-articles/developing-antibodies-for-detection-of-host-cell-protein-contaminants/5118/?kwrd=hcp')
顶部