【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧

最新回复

• wood533 (2014-8-28 18:23:42)

  同关注。不过话说，现在国际上有能力自己开发宿主蛋白的检测试剂盒的，也就那寥寥几家吧

• zzzz (2014-8-28 18:23:58)

  这不用自己开发吧，一般只要你用的宿主细胞不是太另类，都应该可以买到商业化的吧

• dodoit (2014-8-28 18:24:17)

  从重组蛋白开始，国内一直都用商业化试剂盒，没听说还要自己做的。如果这样搞，又得加一层验证工序，不太靠谱吧

• zwsyrt (2014-8-28 18:24:34)

  
  这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的

• xevin (2014-8-28 18:24:55)

  
  前期可以用商业化试剂盒的，临床三期的时候就需要自己的试剂盒了，因为基本上那个时候生产工艺已经确定了吧。

• ending (2014-8-28 18:25:11)

  
  昨天也听说这个了，自己制备抗体挺困难的，企业难度又加大了

• TNT (2014-8-28 18:25:27)

  
  感觉要将原液中的抗体完全去除很难？再说谁又能保证在去除过程中，不会去除部分性质想似的宿主蛋白？前一个问题会导致所制备的宿主蛋白抗体可能存在一定的交叉反应（与目标单抗发生反应）；而后一个问题可能就会导致所制备的抗体不会识别部分宿主蛋白。对了，我也想问一个问题，表达细胞与空细胞之间的宿主蛋白（胞内或胞外上清）差异大吗？如差异小，是不是可以接受楼主所说的第一种方法用空细胞。如差异大，是不是意味着只能选择表达细胞呢？如何评价，如何选择？还得请楼主给点指示，谢谢

• 101010 (2014-8-28 18:25:54)

  这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的
  
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  “2D LC-MS 来测HCP”，目前还不是FDA, ICH推荐/要求的技术，但是安进已经多篇文章发表了，我恰好最近也在关注这方面的问题，ELISA测HCP目前是主流方法，但是该方法也有一些缺点。但是LC-MS测HCP, 成本高，技术本身难度大的多，也更复杂，所以在企业普及，即使是在欧美，我估计也需要相当长的时间。

• 101010 (2014-8-28 18:26:11)

  跟一个老师聊天，讲到了FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒，而试剂盒的开发主要有两种方案，一种是将空细胞按照已定的生产工艺进行发酵和纯化，然后将获得的东西免疫动物制备抗体。还有一种就是将工艺获得原液去除抗体后再免疫动物，好像目前做这个工作的公司只有一家。感觉着两种方法理论可行，实际上操作很难，要做多少才能收集足够多的样品来做抗原呢？
  不知各位业界资深专家有何看法？
  
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  这个要求，我目前还没有看到，FDA官方网站有相关文件吗？即使是”FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒“，企业自己也完全可以外包到CRO公司做，难度并不是太大。特向楼主介绍一篇GEN上的一篇很好的相关文章：Developing Antibodies for Detection of Host Cell Protein Contaminants,
  cuturl('http://www.genengnews.com/gen-articles/developing-antibodies-for-detection-of-host-cell-protein-contaminants/5118/?kwrd=hcp')