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【求助】为什么PCR阳性,但测序是空载呢?
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发表于: 2014-8-30 11:01 作者: ENA 来源: 分析测试百科网
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【求助】为什么PCR阳性,但测序是空载呢?
为什么pcr阳性,但测序是空载呢,有阴性对照。测序公司也换过
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【求助】为什么PCR阳性,但测序是空载呢?
我也来说两句
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pulala
(2014-8-30 11:01:33)
平板上有残留连接产物,建议鉴定采用载体上引物加片段上引物,这样PCR阳性基本上就表明重组成功。
seagate
(2014-8-30 11:01:56)
是的,我以前也出现过同样的问题,一方面反映很可能是连接产物很多,在平板中有残留。另方面就是转化实验失败。建议重新实验。
rxcc33
(2014-8-30 11:03:26)
不要用载体引物鉴定,用前段引物鉴定
zhenxin
(2014-8-30 11:04:11)
做转化时候,连接体系中的片段残留在平板中。做菌落PCR时可能p到了这些片段。。
建议用载体上的通用引物来做PCR。。。
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pulala (2014-8-30 11:01:33)
seagate (2014-8-30 11:01:56)
是的,我以前也出现过同样的问题,一方面反映很可能是连接产物很多,在平板中有残留。另方面就是转化实验失败。建议重新实验。
rxcc33 (2014-8-30 11:03:26)
zhenxin (2014-8-30 11:04:11)
做转化时候,连接体系中的片段残留在平板中。做菌落PCR时可能p到了这些片段。。
建议用载体上的通用引物来做PCR。。。
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