【求助】用ITS1和ITS2进行PCR。。。结果好几次...

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-8-30 16:09 作者: standbyme 来源: 分析测试百科网

查看完整版本请点击这里：
【求助】用ITS1和ITS2进行PCR。。。结果好几次...

很郁闷很郁闷啊。。。
我自己提的手参DNA用来pcr。。。引物是ITS1和ITS2.。。
理论上不是应该是750左右的条带么，为什么我的那么小？而且连引物带都没有？
下面是用同一次提的两个DNA样品做的两次PCR，引物是新定的。。。两张图都是最后两个带是ITS的～
我下面应该怎么办啊？
求高手啊！！！

查看完整版本请点击这里：
【求助】用ITS1和ITS2进行PCR。。。结果好几次...

1.jpg

2.jpg

我也来说两句查看全部回复

最新回复

huifeng0516 (2014-8-30 16:12:55)

是不是你的引物有问题啊，是通用引物吗？我刚做完，条带很亮的
qqq111 (2014-8-30 16:13:21)

有可能是引物的问题！
standbyme (2014-8-30 16:13:50)

QUOTE:
原帖由 huifeng0516 于 2014-8-30 16:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
是不是你的引物有问题啊，是通用引物吗？我刚做完，条带很亮的

引物序列是别人做了以后给的。。。
通用序列是什么？怎么查到？我刚开始接触，不太懂。。。
jujuba (2014-8-30 16:14:49)

QUOTE:
原帖由 standbyme 于 2014-8-30 16:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

引物序列是别人做了以后给的。。。
通用序列是什么？怎么查到？我刚开始接触，不太懂。。。
我把引物序列发给你吧ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC
standbyme (2014-8-30 16:15:35)

QUOTE:
原帖由 jujuba 于 2014-8-30 16:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

我把引物序列发给你吧ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC

序列果然差好多的。。。
您做的也是手参么？
dodoit (2014-8-30 16:15:55)

我弱弱地问一下，这个序列ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC 就是平时跑real-timePCR的引物同一个目的基因的F链和R链吗？
dodoit (2014-8-30 16:16:32)

我还想问一下ITS跑完普通PCR的意义就是看一下是否有霉菌还是？
toy (2014-8-30 16:17:07)

QUOTE:
原帖由 jujuba 于 2014-8-30 16:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

我把引物序列发给你吧ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC

ITS1 最后一个碱基我在有篇文献上看到的是C，这个有影响吗
daod (2014-8-30 16:17:43)

QUOTE:
原帖由 jujuba 于 2014-8-30 16:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

我把引物序列发给你吧ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC

我在一篇文献上查到ITS1的最后个碱基是C有没验证就直接拿去P了，影响大吗，现在就是P不出来啊，求解答呀