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【求助】Tm值与退火温度

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-9-01 16:24    作者: sistis    来源: 分析测试百科网

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【求助】Tm值与退火温度
请问大家 引物的Tm值和退火温度之间有什么关系  如何选择引物的退火温度啊
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最新回复

  • mingming0638 (2014-9-01 16:25:00)


    退火温度一般是引物的Tm值减去5

  • join (2014-9-01 16:25:17)

    Tm值减去3-5度

  • ladyhuahua (2014-9-01 16:25:35)

    合适的复性温度应低于扩增引物在PCR条件下真实TM值的5°----摘自《PCR技术操作和应用指南》。

  • shenkunjie (2014-9-01 16:25:59)


    是上下游引物中，用较小的那个Tm值减去5°

  • youreyes (2014-9-01 16:26:18)

    Tm值减去5度，再根据实际情况逐步提高退火温度从而增加特异性结合

  • misswu61 (2014-9-01 16:26:38)

    应该是-5℃吧，然后如果效果不佳，稍微上下调整零点几度或一两度

  • ha111 (2014-9-01 16:26:54)

    一般的TM值都高于退火温度5-10度。做PCR前最好做一个梯度。

  • zhenxin (2014-9-01 16:27:13)

    基本都是Tm值减去5度啊

  • 园丁## (2014-9-01 16:27:30)

    tm=4(G+C)+2(A+T),退火温度=tm-5 ，试着升高或减低2度看

  • XYZQ (2014-9-01 16:27:48)

    tm值-5度，这样的话那我的引物如果较低那个tm值是53的话，退火温度不是就很低了？

  • nn255 (2014-9-01 16:28:04)

    你在Tm值以下5到10℃，设置一个退火温度梯度，PCR，看哪个结果好不就行了。

  • fangxiang (2014-9-01 16:28:21)

    不是上下游引物较大Tm减去5吗？

  • wiwi (2014-9-01 16:28:38)


    可是，为什么我的上游引物Tm是55.63, 下游引物是50.71,我用的55度退火温度还能扩出结果啊？

  • whitesheep (2014-9-01 16:28:56)

    先做个梯度看看

  • nut6694 (2014-9-01 16:29:28)


        tm值-5度，这样的话那我的引物如果较低那个tm值是53的话，退火温度不是就很低了？
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