【求助】pcr的空白对照每次被污染，什么原因？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-9-21 15:04 作者: fsdd817 来源: 分析测试百科网

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【求助】pcr的空白对照每次被污染，什么原因？

pcr的空白对照是加了buffer5ul，dntp4ul，bsa1ul，引物各1ul，tag酶0.8，剩下的就是加高压灭菌水。各位帮我看看怎么回事？好长时间了，很着急

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最新回复

glass (2014-9-21 15:06:07)

我的最近也遇到了这样的问题，在水里也批出一条很亮的带，和目的片段相当，去测序居然是cds序列。不知道怎么回事？所有的PCR的东西都换了，可是还是那样。我也不知道怎么回事，最近也没有做。
koook5695 (2014-9-21 15:06:34)

可能你的引物被污染了。重新稀释母液试试，我也出现过这种情况
zwsyrt (2014-9-21 15:06:56)

我也出现过后来重新合成的引物 ok啦
fsdd817 (2014-9-21 15:07:27)

QUOTE:
原帖由 zwsyrt 于 2014-9-21 15:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
我也出现过后来重新合成的引物 ok啦
我的细菌的引物是F984和R1378
fsdd817 (2014-9-21 15:07:48)

QUOTE:
原帖由 koook5695 于 2014-9-21 15:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
可能你的引物被污染了。重新稀释母液试试，我也出现过这种情况
引物的问题吗？用不用换引物？
ending (2014-9-21 15:08:03)

也有可能是Tag酶本身纯化的不好，里面残留有基因组！
fsdd817 (2014-9-21 15:08:28)

QUOTE:
原帖由 ending 于 2014-9-21 15:08 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

也有可能是Tag酶本身纯化的不好，里面残留有基因组！
是，有一次我用了新的酶，就没有污染了，但后来继续用新的酶又出现污染。我该怎么办呢
00无名指00 (2014-9-21 15:08:59)

枪用酒精消毒了吗
pulala (2014-9-21 15:09:34)

BSA什么作用？
okhaha (2014-9-21 15:10:01)

你带好口罩手套，在一个相对干净的区域加样，并把你以前用过的全部东西换掉，不论是酶，引物，dNTP,水，统统换掉，肯定不会有问题