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【求助】同一根色谱柱走同样的样品峰型不一样

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-10-20 15:32    作者: dream2013    来源: 分析测试百科网

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【求助】同一根色谱柱走同样的样品峰型不一样
用反相色谱检测蛋白溶液中的曲拉通（Triton X-100 非离子表面活性剂）残余。对照是0.3ug,一直做下来色谱峰都好。但前天做出现了很奇怪的问题，进样0.3ug 100ul 色谱峰分叉，但进高浓度3ug 10ul峰型正常，拿这个样品稀释10倍进样100ul峰型仍然分叉。换了台仪器做还是这样，换了根新的色谱柱也是这样。现在很郁闷实在想不出哪里的问题。排除了样品 流动相 色谱柱的问题。
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最新回复

  • xue258 (2014-10-20 15:32:42)


    响应信号的问题？再找找看有没有别的地方出问题了

  • yyaxw84 (2014-10-20 15:34:23)

    用什么稀释的？

  • 分子式 (2014-10-20 15:34:41)

    我估计是有干扰了，高浓度看不出来，低浓度就分叉...

  • dream2013 (2014-10-20 15:35:18)

    就是水稀释的 可是高浓度的进10ul 最终进去的样品的总量是一样的啊

  • mingming0638 (2014-10-20 15:35:40)


    色谱柱多长，内径多大，能耐受100μl的进样量吗

  • 耗子=== (2014-10-20 15:35:58)


    用什么稀释液？
    用流动相稀释高浓度3ug 10ul，进样看看是否正常

  • dream2013 (2014-10-20 15:36:13)

    用3ug的稀释10倍进样100ul分析峰型分叉，但3ug进样10ul峰型正常。现在真搞不懂到底问题出在哪了

  • dream2013 (2014-10-20 15:36:32)

    色谱柱是 4.6*150mm  5um的

  • gogo (2014-10-20 15:36:51)

    什么色谱柱，流动相是什么？可以用流动相作为溶剂试验。

    是不是只要进样体积小，出峰就没有问题？

    还是考虑一下溶剂为好。
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