【求助】分析下我的标准曲线为什么低?只有80几%...

求高手,分析下我的标准曲线为什么低?只有80几%,而其它扩增曲线及溶解曲线都OK,我用的QIGEN的SYBR GREEN
MIX     10 ul
引物 F 0.4 ul
       R 0.4 ul
CDNA  2   ul
水    7.2 ul


溶曲.jpg


溶曲1.jpg


标曲.jpg


扩增曲线 (1).jpg


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最新回复

  • nut6694 (2014-10-26 20:47:12)

    为什么扩增效率低。。。。。。?
  • finger (2014-10-26 20:57:32)

    求引物序列,模板G+C,片段长度,rtpcr程序
  • tewank (2014-10-26 20:58:07)


    你的线都很好啊
  • tewank (2014-10-26 20:59:29)


    效率可能是引物本身决定的
  • ladyhuahua (2014-10-26 21:00:10)

    可能是退火温度设计不太合理,可稍微调整看看
  • eve_49 (2014-10-26 21:00:36)


    很好 是非常标准的扩增曲线。ct值才有较大的意义,荧光强度其实意义不是很大。就算是同样的一个体系被平均分配到每个孔中最后扩增出来的曲线也相差较大。但是ct值相差不大。
  • 喵咪 (2014-10-26 21:01:27)


    如果引物GC含量合适的话,可以尝试提高退火温度、增加模板用量