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【求助】PCR-DGGE时,PCR引物一定要带GC夹吗?
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做pcr-DGGE,PCR引物一般要GC夹;如果引物不带GC夹做的PCR,产物DGGE有效果吗?
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-10-27 15:52 作者: fei1226com 来源: 分析测试百科网
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gemei0115 (2014-10-27 15:52:27)
gemei0115 (2014-10-27 15:52:51)
一般检不出来吧,没有GC夹的话,现在我也在学习中
dragonkilly (2014-10-27 15:53:15)
为了提高DGGE的突变检出率,可以人为地加入一个高熔点区——GC夹。GC夹(GC clamp)就是在一侧引物的5′端加上一个30~40bp的GC结构,这样在PCR产物的一侧可产生一个高熔点区,使相应的感兴趣的序列处于低熔点区而便于分析。因此,DGGE的突变检出率可提高到接近于100%。
【求助】PCR-DGGE时,PCR引物一定要带GC夹吗?