【求助】PCR-DGGE时,PCR引物一定要带GC夹吗?


做pcr-DGGE,PCR引物一般要GC夹;如果引物不带GC夹做的PCR,产物DGGE有效果吗?

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  • gemei0115 (2014-10-27 15:52:27)

    是的,带了能很高的检测出突变率
  • gemei0115 (2014-10-27 15:52:51)


    一般检不出来吧,没有GC夹的话,现在我也在学习中
  • dragonkilly (2014-10-27 15:53:15)


    为了提高DGGE的突变检出率,可以人为地加入一个高熔点区——GC夹。GC夹(GC clamp)就是在一侧引物的5′端加上一个30~40bp的GC结构,这样在PCR产物的一侧可产生一个高熔点区,使相应的感兴趣的序列处于低熔点区而便于分析。因此,DGGE的突变检出率可提高到接近于100%。