【求助】A549细胞的培养方法~

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-11-01 16:08 作者: vcve 来源: 分析测试百科网

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复苏的细胞，我用含10%血清的DMEM培养基行么~ 还有想确认一下a549细胞到底是悬浮还是贴壁细胞啊~~~~~~~~~~ 急问~~~~~~~

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最新回复

free (2014-11-01 16:08:27)

我们实验室不用DMEM,用含10%胎牛血清的F12'K培养基培养
free (2014-11-01 16:08:43)

另A549是人肺腺癌细胞，贴壁的
vcve (2014-11-01 16:09:01)

谢谢~因为我复苏了一管，结果发现12小时后有很多没贴壁，所以吓了一跳……估计可能是大部分细胞都死了…… 我们实验室只有DMEM，我看也有说用DMEM也可以是，所以想问问有没有确实有用DMEM培养的……
free (2014-11-01 16:09:26)

可能是培养基不对，不过正常复苏细胞是会有很多浮起来，因为在冻存和复苏过程中都会有细胞死亡，另外，复苏细胞等细胞贴壁或者12小时后，最好要换培养基，原来冻存液中的甘油或者DMSO会抑制细胞生长，A549不难养的
vcve (2014-11-01 16:09:43)

谢谢呀~有您这句话我就放心多了……昨天晚上复苏的，今天上午换的液，到了下午一看又有好多浮起来的，浮的我这心哇凉哇凉的……怕死细胞太多影响好不容易活了的细胞，于是刚刚又换了一次液……
vcve (2014-11-01 16:10:03)

还有个问题…… 我这A549细胞怎么总不贴壁啊？？？
free (2014-11-01 16:10:19)

那估计就是死掉啦，复苏后几个小时就会看到有细胞贴壁的，当然也有浮起来的，等换液后基本就是贴壁复苏好的啦，你的老是浮起来，估计是不行啦，再重新复苏看看吧！
vcve (2014-11-01 16:10:35)

我又有新问题了…… A549是不是长的比较慢啊？另外，它的细胞形态是什么样的呢？我感觉好像在显微镜下看不太清，不像293T似的一个一个细胞看的特别清楚…… 是这样的么？:o
gogo (2014-11-01 16:10:50)

A549也是上皮细胞，也是梭形的吧？
free (2014-11-01 16:11:19)

QUOTE:
原帖由 gogo 于 2014-11-1 16:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

A549也是上皮细胞，也是梭形的吧？
对的，A549长得是比较慢，梭型
free (2014-11-01 16:11:40)

是F12培养基,你没有F12的话,也可以试用1640看一下
XYZQ (2014-11-01 16:14:01)

我的A549细胞养不好？

你们好我现在也在养A549细胞但是养的不是很理想 1、细胞的边缘总是出现黑色物质（怀疑是中毒颗粒）。2、细胞贴壁都成“神经元型”两边都有很长的伪足与其他细胞相连（不知是不是正常形态）。3、细胞的“神经元型”三四天也不改变。并且改变后再传代后仍出现同样情形（我用的是DMEM+10小牛，消化用胰酶加EDTA消化后用PBS洗一遍再用培养基中止消化）。希望指点最好能附带几张照片！
wanglaoshi (2014-11-01 16:14:18)

放个温度计，检查一下培养箱的温度，不要太相信面板显示的温度，可能会错，细胞在温度太低的情况下就会长成梭形，分裂减慢。