【求助】请教细胞铺板方法！

最新回复

• any333 (2014-11-01 16:58:30)

  
  你接种的时候要混匀 是不是你没混匀啊

• summerxx (2014-11-01 16:58:46)

  我想请教一下，你是怎么确定孔里有50000个细胞的？

• baidukk (2014-11-01 16:59:03)

  
  先把培养基加入，在将细胞加入后，前后，左右均匀混匀，注意在放入培养箱的时候不要使之晃动，否则由于向心力，又会在中间聚成一团

• summerxx (2014-11-01 16:59:23)

  混匀就行了，混匀。。。。。

• seagate (2014-11-01 16:59:43)

  
  混匀就行，如果是24孔板加一般的时候再混混，千万不要晃培养板，一晃就容易聚堆
  

• bluelake (2014-11-01 17:00:07)

  除了以上大家说的混匀很重要之外，个人经验觉得增加培养液的量也可以改善细胞往中央聚堆的现象，对于24孔板可以从推荐的每孔500ul加大到700ul

• 987789 (2014-11-01 17:00:31)

  使用血细胞计数法

• 987789 (2014-11-01 17:00:47)

  QUOTE:

  原帖由 douding66 于 2014-11-1 16:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  最近用24孔板和6孔板做实验，结果铺细胞时细胞总是往中间聚集，请问这是为什么啊？ 各位有没有碰到过类似情况，怎么解决啊？24孔板铺了50000个细胞 6孔板240000 觉得6孔板和小盘子差不多，没想到也不能铺匀 郁闷阿 哪位高人能够 ...

  平放于实验台上，一个方向，慢慢来回晃，切忌不可让液体旋转（类似搅拌），那样是完全会跑到中间的。

• leifengta (2014-11-01 17:01:12)

  摘抄： 一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。 6孔板12孔板或24孔板，我均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。