【求助】 为什么细胞传代后不贴壁？

最新回复

• HPLC使者 (2014-11-01 23:46:10)

  
  细胞可能已经不行了，
  建议把细胞离心再用新细胞培养液培养。

• utt0989 (2014-11-01 23:46:52)

  
  难道是胰酶消化时间的问题？其他步骤没有错误，消化时间也控制了，为什么还是不行？

• xevin (2014-11-01 23:47:10)

  
  我觉的是你的胰酶用法不当。我们用柠檬酸胰酶，感觉效果特别好。
  没贴壁的细胞肯定已经死了，扔了吧、、、、

• nikonun (2014-11-01 23:47:31)

  我认为细胞不一定死了，在原代细胞培养时尤其如此，除非看见明显的细胞由透明变为暗黑.不知你以前传代后是不是也是如此！消化时间缩短，培养液适量注意PH值血清比例，选用较好的国外培养板，用明胶或多聚赖氨酸包被培养板试试！
  

• seagate (2014-11-01 23:47:48)

  
  可能是胰酶消化时间长了吧，导致细胞壁损伤无法贴壁
  

• wawa (2014-11-01 23:48:07)

  
  这些细胞怎么会有细胞壁呢？
  我也是，贴壁慢，即使贴壁了也长得慢！
  好压抑！

• bangqi_k (2014-11-01 23:48:27)

  
  把详细的Protocol贴出来看看。

• flower@@ (2014-11-01 23:48:45)

  
  胰蛋白酶消化过度。支原体污染。培养液中无贴壁因子。
  缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。
  分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

• flower@@ (2014-11-01 23:49:22)

  
  哦 ，忘记了，应该是高压灭菌后丢弃啊

• duoduo (2014-11-01 23:49:46)

  
  综合３楼和９楼的建议，应当能改善你目前的状况．
  good-luck!

• 7437654 (2014-11-01 23:50:42)

  可能是培养基问题（比如血清），可能是消化的问题
  

• ladyhuahua (2014-11-01 23:51:07)

  应该是细胞活力不行了