【求助】如何从HPLC分析条件发大到HPLC制备条件

对于一个多肽,如何从分析型HPLC的条件放大到制备型的HPLC条件,除了考虑流速,上样量,是否还要改变梯度等其他因素?
刚开始学习多肽纯化,请各位高手赐教!谢谢!

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最新回复

  • whitesheep (2014-11-24 17:19:05)

    如果使用梯度,梯度也可能需要随之调整和改变。我有文献,可用电子邮箱发给你。
  • seagate (2014-11-24 17:19:25)

    有多肽纯化方面的参考书籍吗?望指教?剡老师处有么?
  • leifengta (2014-11-24 17:19:49)

    各大公司都有自己的资料。从理论上,可以参照其他小分子的处理方法。填料现在用c18的很多。
  • TNT (2014-11-24 17:20:04)

    如果要获得最佳的制备效果, 有可能要改变洗脱条件. 原因有两方面, 一方面分析可以使用复杂的梯度, 但制备上必须考虑这种做法是否经济, 通常分析使用的梯度对制备不一定方便. 另一方面, 分析进样量远远小于柱子的载样极限, 样品在柱子里的分配几乎是理想的, 而制备通常都会对上样到一定的过载, 主要组分的量在柱子里分配已经和分析情况很不相同, 通常在增加到一定进样量后, 分离效果都会不同程度的变差, 所以洗脱条件也应作相应调整.
  • TNT (2014-11-24 17:21:27)

    建议你看看这个吧
    cuturl('http://www.herbs-extract.com/cn/ymc/pdf/YMC_Pack_Peptide.pdf')
  • rxcc33 (2014-11-24 17:21:42)


    若以C-18柱子为例,分析方法采用的溶剂系统在制备时觉得极性小了,需增加有机溶剂的量,通常需要实验的。用软件可模拟,但不准确。
  • glass (2014-11-24 17:22:05)

    公式: X2=X1*(r2)*(r2)*C/(r1)*(r1)
    X2 --目标柱(即你的制备柱)最大上样量;
    X1 --分析柱最大上样量;
    r1 -- 分析柱半径;
    r2--制备柱半径;
    C -- 制备柱长/分析柱长 比值
  • junhun (2014-11-24 17:26:12)

    如果有这方面的资料,可以发给我吗?我们也从事多肽分离,可是找不到合适的资料,只能自己摸索,很耽误生产的!谢谢!
  • owanaka (2014-11-24 17:26:33)

    同意楼上 制备尽量不要采用梯度,另外在选择色谱柱的时候要尽量选择硅胶比表面积大的,这样负载量也比较大,减少物料成本,时间成本等
  • owanaka (2014-11-24 17:28:41)

    梯度肯定要改,具体怎么改谁说了也不算,网上能查到计算公式但是不准的。只能靠经验来调,没有经验怎么办,那就慢慢的自己摸索,有信心就好了,不过一定先把分析条件摸好了,分离度大于2是必须的,最好3以上。
  • toy (2014-11-24 17:29:01)

    我是诺华赛公司的孙杰,我们公司是专门做制备分离的公司,是行业内的No.1,有需要可以联系我。