【求助】SSR 实验遇到了一点问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-12-01 16:00 作者: mogu 来源: 分析测试百科网

大家好！刚开始做实验遇到了一点问题，希望大家帮我分析下是什么原因？
我做的是棉花纤维分子标记（SSR）
10微升体系：
buffer: 1
mg2+: 0.75
dNTP:0.25
Taq E:0.2
引物：1
DNA：1
ddH2O:5.8

pcr扩增体系：
94度：4min ( 94度：1min 50度：1min 72度：1min) 2个循环（94度：40s 57度:30s 72度：50s)30个循环 72度：10min 4度：保存

跑的是8%的非变性聚丙烯酰胺胶，但是什么条带也没有，会是什么问题？郁闷当中。。。

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【求助】SSR 实验遇到了一点问题

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最新回复

mingming0638 (2014-12-01 16:01:11)

没有扩增。
mingming0638 (2014-12-01 16:02:17)

要考虑的问题挺多的,先换下模板试试！
rxcc33 (2014-12-01 16:03:29)

marker也没有？
glass (2014-12-01 16:04:25)

这个不好说，在技术纯熟的情况下跑出白板，多半是引物获知模版降解的原因
nn255 (2014-12-01 16:04:40)

反应体系没问题的话，可能就是这对引物本身没有扩增产物。
misswu61 (2014-12-01 16:04:56)

Marker 有没有跑出来啊？如果Marker也没跑出来，说明你的胶有问题，如果Marker跑出来了，说明你PCR没有产物
mogu (2014-12-01 16:06:27)

QUOTE:
原帖由 mingming0638 于 2014-12-1 16:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
没有扩增。
那可能是什么问题？
misswu61 (2014-12-01 16:07:52)

gramene网站最近找不到序列呢？你可以找到吗？谢谢。