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【求助】正相柱与反相柱的洗脱顺序
因基础知识不扎实,对正相柱与反相柱的洗脱顺序十分不解,求高手指教。。【求助】正相柱与反相柱的洗脱顺序
使用时为了能够让组分依次洗脱出来,梯度洗脱流动相的极性是应该怎么变化,水和有机相的比例应该是怎么变化,原理是什么呀?
真希望各位大哥大姐能够帮帮我,谢谢,真的谢谢。
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【求助】正相柱与反相柱的洗脱顺序
【求助】正相柱与反相柱的洗脱顺序
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-12-02 10:41 作者: PCR 来源: 分析测试百科网
最新回复
youreyes (2014-12-02 10:42:43)
否则一句两句也说不明白的。
orangecake (2014-12-02 10:43:14)
梯度:调节流动相比例,达到调节极性目的,引起分子差速洗脱。
junhun (2014-12-02 10:43:40)
反相柱洗脱的时候组分是按照极性从大到小的顺序洗脱的,洗脱剂(如甲醇-水)性从大到小选择,常用的填料有ODS等。
2. 差速迁移机制,分配色谱(分配系数)、吸附色谱(物理吸附)、离子交换色谱(离子交换)、空间排阻色谱(分子大小)各有不同。
nut6694 (2014-12-02 10:44:25)
在液相色谱仪使用过程中,我们经常遇到液相色谱仪用户正反相色谱系统互相现象,但由于使用操作不当,常常不注意间损坏了色谱柱,同时加重了液相色谱系统的污染,导致分析工作出现麻烦,现在将置换工作的基本流程列出,供用户参考:
1. 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现);
2. 卸掉硅胶柱,封好保存;
3. 将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次;
4.换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ,此期间空拨进样阀三次;
5. 安上反相色谱柱, 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统,直到系统平衡;
6.进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。
反相系统换正相系统的注意事项
反相系统换正相系统的注意事项
1.首先用甲醇(或已腈)将色谱系统包括反相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现);
2.卸掉反相柱,封好保存;
3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min),在这期间空拨进样阀三次;
4.换正己烷(硅胶柱)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) , 此期间空拨进样阀三次;
5.安上硅胶色谱柱, 流速调到1ml/min,用正己烷冲洗系统,直到系统平衡;
6.进三针标准品检验面积﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。
birdfish (2014-12-02 10:44:52)
反相色谱柱,流动相极性大于固定相,极性物质容易溶于流动相,难溶于固定相,在洗脱过程中,容易被流动相洗下来,所以极性性大的先出峰(一般情况下是这样的)
【求助】正相柱与反相柱的洗脱顺序