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【求助】提取的质粒 RNA含量高 如何去除
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发表于: 2015-1-25 22:51 作者: zouyou 来源: 分析测试百科网
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【求助】提取的质粒 RNA含量高 如何去除
我提取完质粒后 电泳鉴定 发现有很多RNA 测下OD 260/280比值大于2
我想求助下 如何除去样品里的RNA
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【求助】提取的质粒 RNA含量高 如何去除
我也来说两句
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大花猫bb
(2015-1-25 22:52:16)
加RNase A 消化去除RNA。可以先加1 ul或2ul,37度水浴1-2小时(如果RNA实在太多,仍可消化过夜),然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。
qinqinai
(2015-1-25 22:52:52)
自己手提的是吧?最好一次提取用的菌液少点,这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到100ug/ml就可以了。另外,RNase A容易失活,最好能确定其是否失效。
PP熊
(2015-1-25 22:53:26)
不需要管 过几天就没了。。。RNA太容易降解,要快就加RNase吧
兔子
(2015-1-25 22:54:02)
最好溶解的时候用加有RNAse的水溶解就好了。
小熊妮妮
(2015-1-25 22:54:36)
用试剂盒吧,方便也便宜,从没发现RNA的污染,生工的才几毛钱一个样
jishiben
(2015-1-25 22:55:14)
试剂盒中一般都会带有RNA酶,一般加到P1里面就能解决问题,楼主不会现在还用手提把?
yayayu
(2015-1-25 22:55:52)
RNase是处理的有效方法,注意保证试剂活性,添加量100ug/ml。实验遇到过顽固的RNA,自行降解很缓慢。如果实在难去除,建议考虑过夜处理。
aaby
(2015-1-25 22:56:29)
我们把RNase配成10mg的母液,然后每毫升TE里面就加2ul的RNase,就用TE溶质粒,RNA就没有了,RNase很稳定的
双子座
(2015-1-25 22:57:08)
:jok:RNA 本身就容易降解,因为环境中RNase 比较多,不放心就再加点吧,或者可以试试用RNA清除剂处理一下实验环境。
兔子
(2015-1-25 22:57:52)
RNA自己就会很快讲解的,我做RNA还怕它讲解呢;实在不行,加些RNase吧
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我也来说两句
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【求助】提取的质粒 RNA含量高 如何去除
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大花猫bb (2015-1-25 22:52:16)
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。
qinqinai (2015-1-25 22:52:52)
PP熊 (2015-1-25 22:53:26)
兔子 (2015-1-25 22:54:02)
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