【求助】帮忙看一下胶图，拖尾是怎么回事啊？

最新回复

• bangqi_k (2015-2-15 16:47:50)

  杂带说明有非特异性扩增
  拖尾说明上样量太多   你改上现在的一半
  拙见而已

• yapuyapu (2015-2-15 16:48:26)

  
  目的带很亮很漂亮哦，同意楼上~~

• 911 (2015-2-15 16:48:42)

  
  图片上条带很亮~同意楼上~

• toy (2015-2-15 16:49:00)

  
  考虑胶的原因和PCR时模板量及退火温度

• bangqi_k (2015-2-15 16:49:18)

  QUOTE:

  原帖由 toy 于 2015-2-15 16:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  考虑胶的原因和PCR时模板量及退火温度

  胶是1%的，胶的原因和PCR时模板量及退火温度能造成什么影响呢，愿闻其详，望不吝赐教，谢谢

• kuaizige (2015-2-15 16:49:35)

  
  可以做个空白对照的看一下，或者可能是酶效率不高，换个新的试一试，再把退火温度提高一点看看。
  

• vcve (2015-2-15 16:49:54)

  
  条带很亮的，上样量有点多了，可以少加些！

• bangqi_k (2015-2-15 16:50:21)

  QUOTE:

  原帖由 vcve 于 2015-2-15 16:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  条带很亮的，上样量有点多了，可以少加些！

  上样量是3μl，是不是产物浓度太浓了呢？

• memory (2015-2-15 16:50:50)

  是够浓的，稀释一下再跑跑看
  

• minran_1980 (2015-2-15 16:51:32)

  
  我觉得你PCR是没有问题，很亮，条带单一（不包括你说的2Kb边上的一条带），至于拖尾，你改变一下胶的浓度（1.5%）试试，会不会好一点

• sistis (2015-2-15 16:51:55)

  我的也是这样 而且比这还严重 你可以适当地减少模板的量 或者测序时告诉厂家进行切胶回收

• yychen (2015-2-15 16:52:15)

  点样量过多！

• ero11 (2015-2-15 16:52:35)

  引物特异性不高

• orangecake (2015-2-15 16:53:23)

  
  最近实验室其他人也出现这种问题，比你的还严重，过来学习一下
  

• bgf5 (2015-2-15 16:53:43)

  
  可以减少下PCR循环数，浓度就低了，你这估计就是非特异性扩增，或者DNA有污染。

• ffaa (2015-2-15 16:54:02)

  从结果看，蛮漂亮的，拖尾是浓度高的原因。可以继续下游实验
  

• she (2015-2-15 16:54:31)

  觉得样很好，已经合格了。条带很亮。

• remenb (2015-2-15 16:55:24)

  遇到了类似问题，估计也是胶浓度低了

• TAT (2015-2-15 16:55:45)

  浓度太大了，酶和菌液太多

• leifengta (2015-2-15 16:56:02)

  够量够好啦 ，上样量减少，在跑肯定OK!