【求助】如何养好THP-1细胞

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• ladyhuahua (2015-3-16 17:04:55)

  
  THP-1 细胞是悬浮细胞，相对贴壁细胞要求高一点。细胞养不好，可能的原因有，THP-1细胞特别依赖细胞浓度，ATCC上10 5到106每ML，是一个很高的密度，细胞少了就不太容易养好。
  
  1、细胞株的来源很重要，如直接来源于ATCC（American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心）生命力要强于国内细胞库的
  2、注意细胞的密度一定要高，介于5×105——106/ML之间，增值的快。细胞数量太少，不适合THP-1生长，一般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多，继续培养一天或者两天，培养基严重泛黄，细胞数量会巨增。这一点不同于同是单核细胞系的U937细胞。
  3、THP-1细胞适合在细胞ph环境偏酸环境生长，对培养基变化非常敏感，所以尽量使用相同ph的1640，
  4、还要注意，传代后切忌常移出培养箱观察，否则会影响细胞生长，状态变差，一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1生长相当快，对于状态已经不好的情况，建议传代后3～4天再观察，一般4天时间培养基已明显泛黄，细胞数量巨增。
  
  
  1)THP-1细胞喜欢酸性条件，你不要老是换培养基。越酸的条件，细胞密度越大，细胞就长得越好。
  
  2） 不要频繁换液，一般2-3次换液离心一次（只是补充培养基）
  
  3） 使用1640（ATCC推荐），注意加碳酸氢钠2.5g就可以了，宁酸勿碱
  
  4） 注意冻存的时候密度大些，推荐用血清冻存
  
  5）感觉Hyclone的血清比较好
  
  6）复苏比较慢，建议开始用小瓶，不要用一次性的

• 2541 (2015-3-16 17:05:18)

  “3） 使用1640（ATCC推荐），注意加碳酸氢钠2.5g就可以了，宁酸勿碱
  5）感觉Hyclone的血清比较好”
  
  我直接用hyclone1640，它是改良后的，含有HEPES,就不需要加碳酸氢钠了吧？
  “6）复苏比较慢，建议开始用小瓶，不要用一次性的”
     
  小瓶的意思是多大规格的啊？

• tie8 (2015-3-16 17:05:40)

  您好，我的THP-1总是贴壁，不知哪里的原因，心急如焚，可否向您请教？

• yonger (2015-3-16 17:06:11)

  现在也在养，感觉长得好慢啊

• TAT (2015-3-16 17:06:26)

  THP-1细胞全称是什么？

• memory (2015-3-16 17:06:47)

  刚开始养，半月了还呢么一瓶长的好慢，总结一下可能是换液太勤，决定按大伙的经验试下。