【求助】哪位知道脂质体做透射电镜(TEM)怎么预处理啊

哪位知道脂质体做透射电镜(TEM)时候怎么预处理啊?前段时间做好了之后直接拿铜网捞了晾干,发现效果不是很好,图片是油乎乎的一片,感觉像是垮掉了成了一层膜,我看文献上有的说冰冻切,有的说用戊二醛固定。不知道哪位做过可以支个招啊,最好详细一点,不胜感激。我们这条件应该还可以,一般的仪器设备应该都有。
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  • 小女人@ (2015-7-07 10:27:36)

    目前来说,脂质体做透射电镜,似乎没有什么确定的方法,有的使用磷钼酸负染,有的直接滴在铜网上晾干,应该都可以观察到。你说的效果没有见过,应该就像水滴上去一样。冷冻切是指的冷冻蚀刻吗?那个观察这类微粒应该比较好,但是冰冻蚀刻电子显微镜比较少见。戊二醛固定是不对的,戊二醛固定用于扫描电镜观察,不适于脂质体。
  • 大花猫bb (2015-7-07 10:28:05)

    制备脂质体有一种方法是去垢剂法,但好像用的是胆盐,吐温真心没有听说过。
  • 今生如此 (2015-7-07 10:28:34)

    脂质体中加入吐温有其两面性:
    加入表面活性剂吐温80,其疏水部分可插入膜内,亲水基团伸入水相,嵌入双分子层内。这种”镶嵌“有可能紊乱了磷脂分子的有序排列,引起膜的相特征改变。加入吐温的量超过某一临界值后,表面活性剂会破坏脂质体,引起粒径或浊度急剧下降。
    但在其优化浓度下,表面活性剂修饰能给脂质体带来一定促进作用;如通过改变表面电荷及亲水亲脂性、脂质膜的相特征等,来达到增加包封率,增加稳定性,改变体内生物过程等目的。该体系称为多相脂质体,国内80年代已有产品上市,加入吐温80后,药物除与脂质体相互作用外,还被增容在吐温80的胶束中,所以包封率有所提高。
    但吐温80是有毒,注射使用可能引起溶血。
  • zouyou (2015-7-07 10:29:04)

    用吐温做什么,和脂质体的目的有点悖逆了。
  • 妮子@ (2015-7-07 10:29:34)

    吐温是表面活性剂,有增湿作用,一般用作。。。。有很多的作用,比如片剂啊,水相油相相容什么的
  • 女儿情 (2015-7-07 10:30:07)

    加入吐温-80 可以使油相和水相分布均匀