求助：PCR后电泳条带越来越淡

最新回复

• 小困 (2011-8-21 08:53:02)

  是在扫胶之后看不到条带么？还是在跑胶的时候？跑胶的时候有可能因为胶、电泳液、loading buffer或者上样量的缘故，导致在胶上看不到指示带的。

• 小困 (2011-8-21 08:53:35)

  因为EB往负极移动，电泳时间越久，条带处亮度越弱。PCR条带出，没有EB了，背景会变暗，相对高背景处，条带基本看不清晰，甚至看不到。
  
  建议：电泳液高于胶面1毫米左右，不要太多，不要多天使用同一电泳缓冲液，醋酸会挥发。

• 小困 (2011-8-21 08:54:36)

  引用：是在扫胶之后看不到条带么？还是在跑胶的时候？跑胶的时候有可能因为胶、电泳液、loading buffer或者上样量的缘故，导致在胶上看不到指示带的。
  **********************************************************************************************************
  
  当然是扫胶的时候啊。

• 小困 (2011-8-21 08:55:12)

  引用：因为EB往负极移动，电泳时间越久，条带处亮度越弱。PCR条带出，没有EB了，背景会变暗，相对高背景处，条带基本看不清晰，甚至看不到。
  
  建议：电泳液高于胶面1毫米左右，不要太多，不要多天使用同一电泳缓冲液，醋酸会挥发。
  
  +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++
  
  但是内参和marker却很亮，只有目的片段越来越暗

• 小困 (2011-8-21 08:55:12)

  引用：因为EB往负极移动，电泳时间越久，条带处亮度越弱。PCR条带出，没有EB了，背景会变暗，相对高背景处，条带基本看不清晰，甚至看不到。
  
  建议：电泳液高于胶面1毫米左右，不要太多，不要多天使用同一电泳缓冲液，醋酸会挥发。
  
  +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++
  
  但是内参和marker却很亮，只有目的片段越来越暗

• 小困 (2011-8-21 08:55:41)

  如果内参和Marker 很亮，目的片段相对暗，使用quantity One 时，软件根据最亮片段来计算，亮的条带相对就变弱，Marker 不要加太多。 我上面说的 还是有道理的。