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求助:普通xygen的凸头的PCR管子能用于RealtimePCR吗?
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[转自 丁香园论坛]
如题:普通xygen的凸头的PCR管子能用于RealtimePCR吗?
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跳跳糖 (2011-8-21 12:59:59)
realtime pcr仪需要检测管中荧光信号的变化,普通PCR管的管壁和管盖都不符合这个要求,不适合用于realtime pcr。
我们实验室买的realtime pcr 的管是那种专门的96孔板,没有盖,盖子是一种专门的薄膜,加完样品之后,把薄膜贴上去,放到仪器里就可以了。因为96个管子是连在一起的,用的时候,可以用剪刀剪开,需要几个就剪几个。
跳跳糖 (2011-8-21 13:00:32)
跳跳糖 (2011-8-21 13:01:07)
跳跳糖 (2011-8-21 13:01:45)
跳跳糖 (2011-8-21 13:02:37)
具体来说,管子的选择与仪器的检测原理相关:
1、如ABI(7700/5700/7300/7500/7900)、Stratagene(Mx3000p/Mx3005p)、Bio-Rad(包括MJ,iCyler/option)、Eppendorf等公司的系列荧光定量PCR仪,由于基本都采用平板式的加热方式,一般都采用管盖检测或者管底检测(似乎管盖检测居多),这样就对管子的透光性提出了要求。就我使用来看,Axygen的凸头PCR管的管盖是透明的,应该可以用于该类仪器。
2、如Roche(LightCycler1.2/1.5/2.0,480)和Cepheid(SmartCycler)公司的仪器,采用风浴和单独加热的方式,这两家公司的仪器都需要专用的耗材(好象价格不斐),就不能使用Axygen的耗材。
3、像三楼所说的Corbett(RotorGene3000/6000)的仪器,由于采用风浴的方式,通过管壁检测荧光,对管盖的透光性没有要求,使用平盖和凸盖的管子均可,但要求管壁透光的一致性要好,从我的经验来看,Axygen的管子没有问题。
跳跳糖 (2011-8-21 13:03:51)
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