首页
行业热点
政策法规
产品中心
低碳
前沿Lab
下载中心
群组
群组论坛
博客
搜索
帮助
分析百问
经验共享
展会培训
书刊
新手成长区
推广与广告
分析生活
您的位置:
分析测试百科网
>>
论坛
>>
经验共享
>>
查看帖子
最新更新主题
【求助】pcr引物问题
【求助】求荧光定量PCR步骤
【转帖】实验之美——DNA呈现
【求助】聚丙烯酰胺凝胶电泳
资深专家带你解读精准医学,尽在8日网络讲座!
8日网络讲座,资深专家带你解读精准医学!
【求助】请教大家反转录后PCR加多少模板cDNA的问题
【求助】QPCR扩增效率太低
【求助】荧光定量 PCR扩增曲线异常,超奇怪
【求助】如何在BLAST里寻求引物所能扩增目的片段的长度?
月度关注热点
【求助】有序介孔氧化锆负载氧化铜
【求助】帮忙看下我 这个平均孔径是多少?
【讨论帖】TiO2光催化 你用什么染料最为降解对象?
【求助】Cu XPS 中铜的价态区分
【求助】我想知道通过这些数据怎么计算吸收谱和发射谱
【求助】合成ZSM-5时,为什么P很难进入分子筛骨架
【求助】TD计算的紫外吸收光谱强度可信么?
【求助】请教如何将其高斯分解
【求助】原位吡啶红外谱图异常什么原因?
【求助】远红外波段的吸收有部分来自分子间的作用
[【求助】10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白
字体:
小
中
大
|
打印
发表于: 2015-8-11 14:56 作者: QQ爱 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
[【求助】10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白
10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白?谢谢了,我每次做都聚集了,用什么办法可以阻止聚集呢?谢谢大家了
查看完整版本请点击这里:
[【求助】10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白
我也来说两句
查看全部回复
最新回复
daomei
(2015-8-11 14:57:44)
能够直接连接到蛋白上
但是要注意两个关键问题:
1 纳米金溶液的ph值必须要等于或者略高于蛋白质的等电点
2 蛋白质的浓度要稍高于所需的蛋白量 不足的蛋白量要用BSA补充
纳米金与蛋白的这种连接依靠的是静电吸附 以上两个条件直接影响吸附效果
只要两个条件满足 纳米金是不会发生聚合的 即使向里面加较高浓度的氯化钠
daomei
(2015-8-11 14:58:16)
应该是先将金颗粒修饰一下吧
p1900
(2015-8-11 14:58:45)
楼主可以查查文献 好像清华的有位教授做的不错 感觉和你的比较类似
n111
(2015-8-11 14:59:16)
我觉得静电吸附是一种,其他方式还有很多,比如edc偶联得方式等等,找个综述看一下就明白了
QQ爱
(2015-8-11 14:59:48)
胶体金是一种常用的标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。
1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。
免疫胶体金技术的基本原理
氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
wawa11
(2015-8-11 15:00:20)
蛋白上的巯基能否连在纳米金上啊?
妮子@
(2015-8-11 15:00:52)
应该能,S一般都用来稳定Au
查看全部回复
我也来说两句
查看完整回复请点击这里:
[【求助】10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白
最新回复
daomei (2015-8-11 14:57:44)
但是要注意两个关键问题:
1 纳米金溶液的ph值必须要等于或者略高于蛋白质的等电点
2 蛋白质的浓度要稍高于所需的蛋白量 不足的蛋白量要用BSA补充
纳米金与蛋白的这种连接依靠的是静电吸附 以上两个条件直接影响吸附效果
只要两个条件满足 纳米金是不会发生聚合的 即使向里面加较高浓度的氯化钠
daomei (2015-8-11 14:58:16)
p1900 (2015-8-11 14:58:45)
n111 (2015-8-11 14:59:16)
QQ爱 (2015-8-11 14:59:48)
1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。
免疫胶体金技术的基本原理
氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
wawa11 (2015-8-11 15:00:20)
妮子@ (2015-8-11 15:00:52)
[【求助】10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白