【分享帖】如何做好细胞爬片

最新回复

• DCS (2015-9-10 15:01:15)

  能不能请教一下 免疫组化在细胞上的具体步骤怎么做的啊？

• 131415 (2015-9-10 15:02:58)

  
  这个你可以在免疫版搜索,有很多的

• dog002 (2015-9-10 15:04:46)

  
  请问细胞爬片到哪里买呀，我在大连

• zhezhe (2015-9-10 15:05:01)

  中杉公司的有，你具体问下

• dog002 (2015-9-10 15:05:49)

  
  我是用293t细胞做细胞免疫组化，我们这里叫8-ohDG，我们是在24孔板做的，小片子处理好之后放到孔里，紫外线照1小时，之后就可以铺细胞了，我最大的问题是细胞培养24小时之后，镜下看挺好，但只要一洗细胞就会掉很多，几乎剩下的很少，还有一个问题最后一步染色一般要多长时间，我们有时不到一分钟染色就很重，请帮忙解答一下，谢谢

• #甜# (2015-9-10 15:06:23)

  
  小片子处理好之后放到孔里，紫外线照1小时，
  高压消毒后的小片子，不用再照了
  细胞培养24小时之后，镜下看挺好，但只要一洗细胞就会掉很多，几乎剩下的很少，
  贴壁时间可以延长，洗时候把PBS轻轻滴在片子上，不要摇
  一步染色一般要多长时间，我们有时不到一分钟染色就很重，
  染色时间镜下观察确定，如果染色就很重，适当降低抗体浓度

• qqq111 (2015-9-10 15:06:38)

  就是说洗的时候要很轻是吧，那会不会洗不干净呀，你们用什麽固定液，我们用丙酮，是不是固定液也很关键呀，我们固定10分钟

• xevin (2015-9-10 15:06:54)

  楼主：请教一个问题
  实验新手，现在要做癌细胞实验
  一般都会选什么方法来做啊？

• #甜# (2015-9-10 15:09:19)

  就是说洗的时候要很轻是吧，那会不会洗不干净呀
  不会的,动作要轻柔
  你们用什麽固定液，我们用丙酮，是不是固定液也很关键呀，我们固定10分钟
  
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  玻璃片用冷丙酮(-20度)10-15分钟,可以的,如果放在24孔板里做,最好用甲醛,丙酮会腐蚀有机塑料的,

• #甜# (2015-9-10 15:11:08)

  QUOTE:

  原帖由 xevin 于 2015-9-10 15:06 发表
  楼主：请教一个问题
  实验新手，现在要做癌细胞实验
  一般都会选什么方法来做啊？

  你的实验目的是什么?

• quiqui008 (2015-9-10 15:11:32)

  请问楼主为什麽用冷丙酮固定呀，我们用的丙酮是在4度冰箱里，-20度会比4度效果更好吗

• ldh (2015-9-10 15:15:36)

  
  呵呵，丙酮是在4度也可以，问题不大

• am10 (2015-9-10 15:15:53)

  我的目的是用药物干预癌细胞
  看癌细胞的凋亡衰竭的情况

• #甜# (2015-9-10 15:19:19)

  QUOTE:

  原帖由 am10 于 2015-9-10 15:15 发表
  我的目的是用药物干预癌细胞
  看癌细胞的凋亡衰竭的情况

  MTT或者流式了

• 969 (2015-9-10 15:19:36)

  
  谢谢楼主
  主要是现在时间比较紧
  那种方法较简单易做
  容易出结果

• #甜# (2015-9-10 15:19:55)

  
  这两个方法比较通用，也不太费时间，呵呵

• 555444 (2015-9-10 15:20:14)

  你好。最近我也开始做细胞爬片，是神经细胞。有个问题想请教以下Smile
  盖玻片的处理已经照园子里介绍的方法处理了，不过我用了多聚赖氨酸处理后，细胞更长不好了，不知为什么？？
  l另外最近听一个师姐说，接种时只接种在盖玻片的中英一两滴，待第二天再补足量，这样细胞会不会营养成分太少呢？

• gmt (2015-9-10 15:20:30)

  楼主，请问一下，能用到24孔板的专用细胞爬片在哪里可以买到啊？

• ALALA (2015-9-10 15:22:30)

  想问一下神经细胞爬片有没有好的方法啊？

• kulee (2015-9-10 15:23:05)

  楼主，请问一下，能用到24孔板的专用细胞爬片在哪里可以买到啊？
  
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  我们也在24孔板爬片，我们用的方法是把厚的载玻片分割成四片，弄放进24孔板，效果不错。