求助：PCR产物跑不出加样孔？

最新回复

• 阿拉蕾 (2011-9-16 12:57:14)

  你的产物偏大－4k，所以你最好不要用1%的胶跑
  你可以试试0.6-0.8%的胶跑
  用15k的marker，跑的时间可以稍微长一些。
  你的产物没出加样孔很可能是胶太浓了
  不过也有可能你的产物里没有你要的片断，即你的pcr条件还不够严格。

• 阿福 (2011-9-16 12:57:36)

  呵呵，以我的经验，你这次试验比较奥倒霉而已。没有任何办法，只有重新作PCR。不过这种情况出现的次数很少，不用担心。

• 小蜜蜂 (2011-9-16 12:57:58)

  我也出现了这样的现象
  基本上应该是pcr本身的问题
  同时的mark没问题

• 韩梅梅 (2011-9-16 12:58:21)

  很可能是模板或PCR试剂中的过多杂质造成的, 与PCR过程或PCR产物本身无关.
  
  建议做以下几个管:
  1. Marker
  2. PCR初始反应混合液
  3. PCR反应产物
  4. 1+2
  5. 1+3
  
  然后电泳, 再把电泳结果贴上来看看.

• 大仙 (2011-9-16 12:58:44)

  改用0.6---0.8%的琼脂糖，小电压（50V左右）过夜试试。

• dreaming (2011-9-16 12:59:03)

  模板是什么？检测模板能否跑出加样孔？如不能，则是模板本身含多糖等杂质太多。

• 微笑的海豚 (2011-9-16 12:59:26)

  那你的模板是基因组DNA的话自然很难跑出来更不要说你有PCR结果了

• 庄梦蝶 (2011-9-16 12:59:50)

  谢谢楼上各位的指点，我的模板是PCR产物，再做PCR。

• 庄梦蝶 (2011-9-16 12:59:50)

  谢谢楼上各位的指点，我的模板是PCR产物，再做PCR。

• 小鼹鼠 (2011-9-16 13:00:12)

  我也遇到过类似的情况，原因不清楚
  http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=44212&sty=3

• dior (2011-9-16 13:00:33)

  pcr的问题，不管胶什么事。重作

• 胖小妮子 (2011-9-16 13:00:55)

  看看胶孔是否干净！梳子是否干净！

• =菓子= (2011-9-16 13:01:15)

  在尚样缓冲液加点SDS，试试，不行就是你的PCR产物不行。