SOS：我的引物-20度保存一年了，PCR全无结果，是引物原因

最新回复

• 鲁西西 (2011-9-21 13:15:20)

  如果冰箱没有问题，那应该不是引物的问题，因为我们用保存2年多的引物来验证提的模板，效果都很好。

• +田田+ (2011-9-21 13:15:48)

  是的！只要冰箱没问题，引物放一年应该没问题！建议检查模板等其他条件！

• wawa (2011-9-21 13:16:07)

  不是引物原因

• 大仙 (2011-9-21 13:16:27)

  应该不是引物的问题！我用的在－20度保存了2年了一样没有问题！  

• 年轮 (2011-9-21 13:16:52)

  建议使用引物前先混匀离心再打开盖，另外可以增加模板量，降低退火温度再试一下！  

• 果冻也酸 (2011-9-21 13:17:27)

  实在不放心引物，取2微升跑一个琼脂糖电泳，就知道降解了没有！

• @木木@ (2011-9-21 13:17:48)

  应该没问题的。我的引物放了2年多，还可以用啊！

• 魔法师A (2011-9-21 13:18:25)

  有可能是引物的问题，特别是稀释后的引物，最容易出问题。

• 魔法师A (2011-9-21 13:18:25)

  有可能是引物的问题，特别是稀释后的引物，最容易出问题。

• 桔囿 (2011-9-21 13:19:24)

  说得对，的确可能是引物原因。

• 桔囿 (2011-9-21 13:19:24)

  说得对，的确可能是引物原因。

• 糊涂虫 (2011-9-21 13:20:07)

  我觉得是引物问题，因为我们的引物放在冰箱里半年后就跑不出来了，我当时也很忧闷，但我试试其他引物就可以跑出来。

• 阿拉蕾 (2011-9-21 13:20:33)

  有可能是引物的问题，特别是稀释后的引物，最容易出问题。
  
  
  储存使用浓度的引物不会导致降解，上面几位说得很好，在－20度3年都没有大的影响。

• 韩梅梅 (2011-9-21 13:21:06)

  储存使用浓度的引物不会导致降解，上面几位说得很好，早－20度3年都没有大的影响。
  
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  我不明白你的意思,你是说引物稀释后可以储存3年吗？不可能吧，我同事作了几年了，他说买回的引物不稀释可以放两年，都没问题；但是，引物稀释后，放几个月都有可能出问题的，他遇到过几次

• 阿拉蕾 (2011-9-21 13:21:28)

  是这样的，我得引物使用浓度为20uM，所有pcr扩增都统一，30、50ul的反应体积中上下游引物各加1ul。
  
  我今实验室的时候，有个phd师兄刚毕业，留下了一大堆引物，有的是干粉，也有的是溶解成使用浓度的，据他介绍是1998年前后合成的，那时是2000年初，这已经有2年了。我从开始做phd，到毕业前半年，又有近三年了，一共大概是5年的时间吧，一直都在用他的引物，没有发现你们说的问题，真的！

• 不懂 (2011-9-21 13:21:45)

  干粉的引物-20保存3年没有问题，稍加稀释的干粉引物(不是使用浓度)也没有太大问题。如果是使用浓度的引物，国外很多实验室的规定是超过一个月就不能用了(不过是4度储存)。我感觉虽然没有这么严重，-20度存几个月肯定没有问题，再长一点时间普通PCR还好，定量PCR 结果差别就比较明显了。

• 喵咪 (2011-9-21 13:22:28)

  干粉的引物-20保存3年没有问题，稍加稀释的干粉引物(不是使用浓度)也没有太大问题。如果是使用浓度的引物，国外很多实验室的规定是超过一个月就不能用了(不过是4度储存)。我感觉虽然没有这么严重，-20度存几个月肯定没有问题，再长一点时间普通PCR还好，定量PCR 结果差别就比较明显了。
  
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  [size=4]我没有象你说的这么明白，我没用过干粉，受教了，不过稀释的引物确实容易出问题，大家都达成共识了，呵呵