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【求助】用SEM很多,但是需要固定什么的
自己分离到一个芽孢杆菌,准备一个分离菌种和发酵特性的文章。【求助】用SEM很多,但是需要固定什么的
想要用电镜表征一下菌体,包括营养体和芽孢体
用SEM很多,但是需要固定什么的
听说环境扫描电镜不需要处理,更适合微生物表征
有做过相关分析的朋友吧,期待指教。做环扫电镜,对微生物样品有什么要求,需要怎么处理样品
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【求助】用SEM很多,但是需要固定什么的
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2015-11-01 12:16 作者: wawa11 来源: 分析测试百科网
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886爱 (2015-11-01 12:17:07)
微生物细胞等含水量大,不耐真空,真空脱水变形严重,在高真空或者低真空常规模式下观察,都需要按照常规方法制样,尽可能的保持细胞原装到干燥为止,一般相对新鲜的细胞或者微生物原貌,一般会有大约10-15%的收缩,有些芽孢类收缩率高达60%,。就像枣,鲜枣和干枣外形有些不一样,但我们都还知道那是枣,些许收缩,一般应该不会影响识别,估计大家也都认可。
常规或者换扫的差别主要体现在,是否追求活鲜的原貌。
在追求活鲜微小生命体原貌的道路上,冷冻电镜技术走在前面,一种使用常规高真空模式观察新鲜微生物或者细胞原貌。在电镜样品室安装专门的冷冻样品台,在样品室内首先进行冷冻,然后切割露出组织或者细胞,在电镜样品室内喷金或者不喷金(组织体液具有一定导电性)直接观察形貌。冷冻电子显微术实现了高分辨观察微小生物体新鲜原貌,但的我知道的国内某单位招标的最贵冷冻台价格大约70万人民币,代价很高。
无论如何冷冻电镜技术在操作技术上上还是比较难的,而且要获得好的效果,代价高昂,
因此,生命科学显微工作者发明了环境扫描电镜技术,并进行常规扫描电镜的改造推广, 这个技术后来卖给了飞利浦,现在的FEI环境扫描电镜。可以观察新鲜的微小生命体的原貌,当然设置好条件,你也可以动态观察,细胞水分挥发,收缩变形的过程。
从指标上看环境扫描电镜分辨率也非常高,不过国内做环扫的大多水平不高,这个和使用机制有关系,大多数情况下得不到好的结果,也许实验室的操作人员会建议你使用环境扫描电镜的常规模式。
xiaoxiaoai (2015-11-01 12:17:27)
当摆设的多,事实上配置不完善的多,对于生命科学的探索,代价确实很高。
看一下这个科普视频:
动态观察水在冷玻璃上凝聚和蒸发的过程,这就是环境扫描电镜。如何保持静止,这需要样品台变温技术和样品仓水蒸气压力调节适合。
跳跳哈里 (2015-11-01 12:17:49)
yayayu (2015-11-01 12:18:10)
小女人@ (2015-11-01 12:18:31)
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