关于引物的基本概念

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• 王六六 (2011-9-24 08:27:20)

  不对吧,上游引物序列与CDNA第一链的部分序列是一样的，下游引物则与cdna下游序列互补。这样说来，上游引物不可能用来引导dna第二链的合成，而我看的分子克隆提及正义引物可以用来引导dna第二链的合成，若上游引物就是正义引物的话，岂不是产生矛盾。
  2。另外，还有疑问，就是据说下游引物可以用来在反转录中产生特异性的CDNA第一链，怎么可能呢。根据概念，应该是上游引物才对阿，这边也是很胡涂，盼解！！

• boom (2011-9-24 08:28:26)

  上游引物和下游引物是按照位置来分的。与mRNA相同的引物为正义引物，而与其互补的是反义引物。所以上游引物对应的是正义引物，下游引物对应的是反义引物。
  画了个草图表示一下。水平太菜，见笑了。

  
  56256025.jpg

• =菓子= (2011-9-24 08:31:34)

  我又试了一次,还是不行.
  
  你把引物和模板的结合原理混淆了，我给你重新修改了一下图，你看了就明白了
  
  上游引物和GENEBANK中给的序列的互补链结合，所以，引物是不反向的，由于你把引物反向了，当然就结合不上去了。这个是你出现错误的根本原因。
  
  OK，下游引物我就不贴图修改了，你自己试试，看看我说的对不对。
  
  注你这次好运拉
  
  (Click the picture to see the source)
  
  请问这又如何解释？？？

• 韩梅梅 (2011-9-24 08:32:13)

  对呀！genebank里的序列是与mRNA相同的序列，是有意义链的序列。上游引物与其序列相同，与其互补链结合。

• mogu (2011-9-24 08:32:46)

  本人看了一篇外文，觉得很奇怪，他把上游引物和下游引物写出来，我和基因序列一比较，发现上下游引物都和基因序列相同，按理说应该下游引物与基因互补才对。