【求助】0.1％的二型胶原酶怎么配？

最新回复

• shenkunjie (2015-12-11 11:05:46)

  不知你的胶原是不是无菌的，我用的是sigma的四型胶原粉末（装于无菌瓶中），我的实验要求浓度也是0.1％，其配制方法为：以去离子水配好0.1%冰醋酸（乙酸）溶液后,可以先以0.22微米的微孔滤膜过滤,然后再以无菌注射器吸取适量溶液至胶原瓶中溶解胶原，放置2-8摄氏度数小时,期间每隔半小时左右振荡一次，观察胶原全部溶解后分装保存于4摄氏度.。
  如果你的胶原不是无菌的，那就先以0.1％冰醋酸溶解后一起过滤，但可能比较费力。

• iii_ii (2015-12-11 11:06:04)

  
  请问胶原酶能保存多久？

• 芙蓉宫主 (2015-12-11 11:06:22)

  
  是呀，过滤确实比较麻烦，上次过滤胰酶没把我累死！呵呵可是我用的不是无菌的，我查的资料也没有二型胶原酶的具体配制方法！但是有的资料上说，胶原酶用基础营养液或Hanks液配制!也是配成0.1％的！而且在－20摄氏度保存！谢谢你啊！！

• vvmmoy (2015-12-11 11:06:41)

  我自己配过，方法很简单，虽然我不知道对不对，但以后的实验证明一直没问题，我的方法是先配成10倍的浓缩液即1%的胶原酶。因为直接配成工作液放置太久怕失活。具体来说吧，每次称0.2克胶原酶，用PBS20毫升溶解。可以让磁力搅拌充分混匀。后用0.22微米的滤纸过滤除菌，然后以每只1毫升分装到EP管。标记好，-20度保存。每次用的时候取一只用培养基稀释成需要的浓度。

• one (2015-12-11 11:06:57)

  我的胶原酶是要配成70ku/L的怎么配啊？我买来的是进口分装好的100mg的冻干粉的，谁来帮帮我啊？

• linlinstar (2015-12-11 11:07:17)

  QUOTE:

  原帖由 vvmmoy 于 2015-12-11 11:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  我自己配过，方法很简单，虽然我不知道对不对，但以后的实验证明一直没问题，我的方法是先配成10倍的浓缩液即1%的胶原酶。因为直接配成工作液放置太久怕失活。具体来说吧，每次称0.2克胶原酶，用PBS20毫升溶解。可以让磁力搅拌充 ...

  最好不要配成浓缩液，因为可能影响到溶解度，导致部分未溶解的被滤除，从而影响工作液的终浓度。
  “以后的实验证明一直没问题”。其实是不能证明什么的，因为降低浓度同样可以消化。

• linlinstar (2015-12-11 11:08:12)

  QUOTE:

  原帖由 one 于 2015-12-11 11:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  我的胶原酶是要配成70ku/L的怎么配啊？我买来的是进口分装好的100mg的冻干粉的，谁来帮帮我啊？

  根据说明书给的活性单位，换算成单位（U）/mg，或千单位（ku）/mg。再计算每ml需要多少mg，100mg应该配多少ml，按计算的量加D-Hanks溶解。

• txwuyan (2015-12-11 11:08:29)

  把10mg二型胶原酶粉末如何配制成0.1%的？用PBS?

• 131415 (2015-12-11 11:08:58)

  
  二型胶原酶的配制可以用PBS溶吗？

• SO2 (2015-12-11 11:09:18)

  可以用dmem来配置吗？