【求助】材料问题

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• ero11 (2016-1-12 16:52:23)

  
  培养基:建议买GIBICO的液体,规格是500ml/瓶，价格大约80左右。
  0.25%胰酶和EDTA:建议买GIBICO的，国产的吉诺也行，规格是100ml/瓶。
  血清：国内的常用杭州四季青，国外的比较好的是Gibco及Hylcone的。规格有100ml/瓶和500ml/瓶。最好买
  500ml/瓶的，自己再分装，这样比较合算。
  抗生素：我们用的是国产碧云天的青霉素-链霉素，100ml/瓶，一瓶就足够用一个学期了。
  冷存管：建议买corning,2ml,平底，内旋，一般是50个/包
  PBS粉末：建议买博士德公司的，才几块钱一包，现成的粉末用超纯水一冲就行，一包粉末可配2升PBS。
  一次性塑料细胞培养瓶：建议买corning，有25cm和 75cm两个规格，最好都买一点。常规培养用25cm塑料
  培养瓶的，扩大培养是用75cm塑料培养瓶。25cm的是20个一包，75cm的是5个一包。注意一定要买瓶口带滤膜，虽然贵一点， 但可以减少很多污染。
  封口膜：用来封冻存管或者试剂瓶，可减少污染。
  96孔板，24孔板：建议买corning的，规格是50个/箱。似乎96孔板更实用。
  离心管：经费少的买玻璃的，用过了泡泡酸液再用。 经费够的话买corning的一次性塑料离心管。15和50ml两个规格都要买。15ml的用得比较多，需要多买些。50ml的有一包就够了。 有20个/包和50个/包的规格。
  滴管：玻璃的和一次性塑料的都行，至少要个200只。如果实验室有5ml规格的移液枪，这个可以省了。
  DMSO：建议买sigma的，100ml/瓶的，买一瓶，拿来配置细胞冻存液。国产的配药可以，不能用于冻存细胞。
  细胞计数板：若实验室有电子细胞计数仪，这个就不用了。没有的话，就买2块细胞计数板。还有载玻片。
  镊子：至少4把。
  1.5ml的EP管：分装少量液体用。规格是1000个/包。一包就够了。
  25ml玻璃试剂瓶：建议买50个左右，用来分装血清或者装少量试剂。
  100ml玻璃试剂瓶：建议买10个左右，用来分装血清或者装少量试剂。
  250ml玻璃试剂瓶：建议买10个左右，用来分装PBS或者装培养基。
  500ml玻璃试剂瓶：建议买2个左右，用来分装PBS。
  大号不锈钢饭盒：装高压消毒物品。至少4个。
  0.22um一次性针孔过滤器：规格是50个/包。可买可不买。主要是怕药物污染时过滤用。顺便配套买20ml一次性注射器20个。
  最后就是你的毒性实验准备用什么方法做？不知道这个，没法推荐。

• vera+ (2016-1-12 16:52:56)

  冻存管建议选择内旋，要是只能外旋，建议加封口膜；吸液球貌似不用，10ml吸管就能解决（3ml的换液时不方便，两个规格最好都有），还方便操作；试管，我们实验室从来没用到过；貌似没有DMEM.....拙见，贻笑大家了

• moonlight (2016-1-12 16:53:16)

  
  培养液有配好的，一般为500ml，血清100ml，国内的常用杭州四季青，国外的比较好的是Gibco及Hylcone的。大部分是买回来自己配进双抗（青霉素和链霉素）和血清即可。你还需要准备些分装配好的培养基的瓶子。我们实验室用的是临床上用过的左氧氟沙星注射液的玻璃瓶（100ml），一般是每瓶装配好的培养基80ml，1640 72ml，胎牛血清8ml。另外还需要移液器及枪尖。此外配置PBS缓冲液需要的原材料是：氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠及磷酸二氢钾。铝制饭盒。离心管我们常用的是15ml的。还要些小的玻璃瓶，用来分装胰酶。还有封口膜。棉球，75%的酒精等等。需要的东西挺多的，实验室应该有一些。还有纱布、尖吸管，5ml或10ml的吸管。就这些吧。我也是做实验才几个月。只列了些常用的。

• redbutterfly (2016-1-12 16:53:51)

  
  好似不太一样，吸液球？......偶们不用培养瓶，所有细胞一律在一次性的flask里面养，个别实验直接培养在collagen涂覆的6,24,96孔板上.但是所有传代工作都是在25ml？的那种长方形鹤嘴flask里面。DMEM来自invitrogen美国，elastarase，FBS，penicillin，streptomycin也都来自美国，尽管日本人那么爱支持日本产的东西，这个方面从不含糊的要美国货还是有道理的。所有移液过程都是使用美国产移液枪，枪头为聚乙烯的移液管，5ml，10ml，25ml，50ml均有。移液过程均一次性替换，杜绝污染。小的pippetor配备2种枪头，普通的无菌型的和超长的白色无菌型的以配合15ml离心管，pippetor有几种，一是1个1ml的，1个200uL的1个20uL的和一个8通道排枪。你还需要涡旋和试管架，无菌的钝头剪刀黑色有机相签字笔，长纤维擦镜纸，镊子，酒精喷壶，似乎就这么多吧。。。。。。。看情况选配。关键是超净台和细胞室必须无菌，24h恒温和卫生打扫（月2次）是必需的，大概如此

• Darcy (2016-1-12 16:54:07)

  
  冷的细胞还要液氮罐，DMSO

• 45778 (2016-1-12 16:54:25)

  
  培养基:建议买GIBICO的液体,规格是500ml/瓶，价格大约80左右。
  0.25%胰酶和EDTA:建议买GIBICO的，国产的吉诺也行，规格是100ml/瓶。
  血清：国内的常用杭州四季青，国外的比较好的是Gibco及Hylcone的。规格有100ml/瓶和500ml/瓶。最好买
  500ml/瓶的，自己再分装，这样比较合算。
  抗生素：我们用的是国产碧云天的青霉素-链霉素，100ml/瓶，一瓶就足够用一个学期了。
  冷存管：建议买corning,2ml,平底，内旋，一般是50个/包
  PBS粉末：建议买博士德公司的，才几块钱一包，现成的粉末用超纯水一冲就行，一包粉末可配2升PBS。
  一次性塑料细胞培养瓶：建议买corning，有25cm和 75cm两个规格，最好都买一点。常规培养用25cm塑料
  培养瓶的，扩大培养是用75cm塑料培养瓶。25cm的是20个一包，75cm的是5个一包。注意一定要买瓶口带滤膜，虽然贵一点， 但可以减少很多污染。
  封口膜：用来封冻存管或者试剂瓶，可减少污染。
  96孔板，24孔板：建议买corning的，规格是50个/箱。似乎96孔板更实用。
  离心管：经费少的买玻璃的，用过了泡泡酸液再用。 经费够的话买corning的一次性塑料离心管。15和50ml两个规格都要买。15ml的用得比较多，需要多买些。50ml的有一包就够了。 有20个/包和50个/包的规格。
  滴管：玻璃的和一次性塑料的都行，至少要个200只。如果实验室有5ml规格的移液枪，这个可以省了。
  DMSO：建议买sigma的，100ml/瓶的，买一瓶，拿来配置细胞冻存液。国产的配药可以，不能用于冻存细胞。
  细胞计数板：若实验室有电子细胞计数仪，这个就不用了。没有的话，就买2块细胞计数板。还有载玻片。
  镊子：至少4把。
  1.5ml的EP管：分装少量液体用。规格是1000个/包。一包就够了。
  25ml玻璃试剂瓶：建议买50个左右，用来分装血清或者装少量试剂。
  100ml玻璃试剂瓶：建议买10个左右，用来分装血清或者装少量试剂。
  250ml玻璃试剂瓶：建议买10个左右，用来分装PBS或者装培养基。
  500ml玻璃试剂瓶：建议买2个左右，用来分装PBS。
  大号不锈钢饭盒：装高压消毒物品。至少4个。
  0.22um一次性针孔过滤器：规格是50个/包。可买可不买。主要是怕药物污染时过滤用。顺便配套买20ml一次性注射器20个。
  最后就是你的毒性实验准备用什么方法做？不知道这个，没法推荐。

• vvmmoy (2016-1-12 16:56:10)

  
  75%酒精：看你的情况，我们一般以买就是一箱。２０瓶。
  酒精喷壶：至少２只。
  油性笔：至少２只。

• feixi (2016-1-12 16:56:28)

  
  我最近也在计划做细胞实验，以下是我买的部分耗材。楼主可以参考一下
  Corning,2.0ml圆底可立外旋冻存管,6孔板 ,24孔板,48孔板,标准96孔平底板,60MM培养皿,100MM培养皿,15ML离心管(有泡沫架),50ML离心管(有泡沫架) ,*25CM正方斜颈透气盖,10ML橙色标移液管,25ML红色标移液管。
  Axygen，200ul袋装黄枪头，1000ul袋装蓝枪头，10ul袋装白色枪头，1.5ml EP管，2ml EP 管，200ul灭菌盒装枪头，1000ul灭菌盒装枪头，10ul灭菌盒装枪头。
  移液器，eppendorf，5mL，1mL，200微升，100微升，20微升，10微升，排枪100微升。

• ero11 (2016-1-12 16:56:48)

  
  封口膜

• ujne (2016-1-12 16:57:03)

  
  我也是刚开始做的，也在准备实验耗材，其实买什么是根据你养的细胞所需来决定的，如果你的细胞是买的，那你就看卖给你细胞的地方用的什么牌子、规格的培养液、血清等，你就按照他们的要求去购买就可以了，而像实验材料，例如：培养皿、量筒、漏斗、吸管、贮液瓶、废液瓶、酒精灯、铝制饭盒、贮槽、橡胶吸头、剪刀、镊子、移液枪……这些非一次性的物品如果你在的实验室可以共用的话就不要买了。
  培养瓶、滤器、标签纸、封闭各种瓶管的胶带和胶塞、注射器（1ml、5ml、10ml等）、移液枪头（200ul、1ml等）、75%酒精、棉花、手套、多孔培养板（96孔、6孔）等这些一次性的物品肯定是要你自己买的，你打电话到耗材公司，她会告诉你规格问题的，什么是按包买的，什么是按个买的。
  还有就是你不需要一开始就买好多，先买一些用，一边做实验一边看什么快用完了再定也来得及的。
  还有什么不清楚的，可以问我啊，我们一起讨论下~~~

• seagate (2016-1-12 16:57:20)

  11楼
  细胞培养注意事项
  1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔
  ........
  详见进入下面网址：
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