【求助】SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助

最新回复

• zhenxin (2016-1-13 11:35:22)

  做胶的问题，你跑出来的条带歪歪扭扭的可能是两块玻璃板没放好，或者是固定的时候板子两端力度不一样就会这样。

• vera+ (2016-1-13 11:35:46)

  胶没制好吧？
  

• flower@@ (2016-1-13 11:36:04)

  QUOTE:

  原帖由 vera+ 于 2016-1-13 11:35 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  胶没制好吧？
  

  胶的问题吗？可是制胶都是同样的步骤，怎么会出现问题了？

• feixi (2016-1-13 11:36:21)

  胶没制好，我导师说胶制出来至少要一个小时后结构才稳定，才能用，也可以先不点样空跑十分钟，再加样跑，试一下吧。原来我跑的也不好，后来多了就好了，老师都夸我了呢

• join (2016-1-13 11:36:41)

  请问你用的是什么胶？就是跑常规PCR产物用的胶吗？百分之多少的胶？电压和电流是多少呢？谢谢！

• xiaoxiaoniao (2016-1-13 11:42:48)

  胶没有溶解完全还有细小颗粒，或者没有彻底凝固，电泳液及时更换，恒电压跑，自己考虑这几方面。
  SSR引物扩增产物，若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性，其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAGE。

• qiangren789 (2016-1-13 11:43:05)

  应该是胶没有做好，没有等琼脂变成透明的时候就拿出来了吧。

• flower@@ (2016-1-13 11:44:15)

  QUOTE:

  原帖由 join 于 2016-1-13 11:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  请问你用的是什么胶？就是跑常规PCR产物用的胶吗？百分之多少的胶？电压和电流是多少呢？谢谢！

  对啊，就是制的普通的，比例是1%，电压是150

• flower@@ (2016-1-13 11:48:36)

  QUOTE:

  原帖由 qiangren789 于 2016-1-13 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  应该是胶没有做好，没有等琼脂变成透明的时候就拿出来了吧。

  放了一个多小时呀

• flower@@ (2016-1-13 11:53:25)

  QUOTE:

  原帖由 xiaoxiaoniao 于 2016-1-13 11:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  胶没有溶解完全还有细小颗粒，或者没有彻底凝固，电泳液及时更换，恒电压跑，自己考虑这几方面。
  SSR引物扩增产物，若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性，其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAGE。 ...

  嗯。谢谢指导！想着先跑个琼脂糖电泳看有没有条带，回头再跑PAGE了

• yayya (2016-1-13 11:53:53)

  胶都没摇匀，浓度不均一
  

• koook5695 (2016-1-13 14:07:50)

  放了一个多小时呀
  ...
  
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  胶没做好吧！可以增加加热胶的时间，使胶充分溶解，再做胶，看看！
  

• finger (2016-1-13 14:09:08)

  跑成这样，跟胶本身的浓度以及电压都没有关系，相信你每个系列的条带都差不多，这只能是胶本身的问题。1、可能在溶胶的时候，胶已经快要凝固了，你才倒到制胶槽里。2、你在胶还没有干的时候，就拿出来用了。制胶的时候最好先戴手套碰碰胶，等它硬邦邦的时候，就差不多可以拿出来了。

• finger (2016-1-13 14:09:34)

  琼脂糖胶吗？应该不会传这个问题呀，出现这个问题主要原因就是胶浓度太低，或者电泳过程中受热不均，冷却一下，电泳环境就ok，再或者就是电泳液时间久了，跟产物没关系。

• txwuyan (2016-1-13 14:09:52)

  不会是溶解琼脂糖的时候没融好吧，没有成透明状态

• qhyu (2016-1-13 14:10:09)

  还是应该用SDS-Page胶，你做的普通琼脂糖胶，看样子是你电泳液没有抹过胶，或者电泳槽没有放水平