【求助】PCR条带弥散的问题

最新回复

• 101010 (2016-2-10 17:59:53)

  
  先看看你模板的浓度是不是太高了，讲解的怎么样
  如果没有特殊的就是你就没扩充来东西而已啦
  哈哈

• chengjie79 (2016-2-10 18:00:08)

  
  我之前也遇到这样的情况，一开始实验做的很好，但是后来就弥散了，而且是之前好的重新做也是弥散的，真的是搞不懂什么原因，什么方法都用了，比如说换新的试剂，换反应体系等，但是结果还是弥散，有没有什么好办法解决这个问题，大家快来帮帮忙！

• yyaxw84 (2016-2-10 18:00:23)

  
  优化Tm,降模板，降Mg
  如果都优化过了，怀疑dNTP有问题

• october7 (2016-2-10 18:00:38)

  
  模版有没有降解

• seagate (2016-2-10 19:36:49)

  
  应该不是试剂的原因，除了引物不一样，其他的引物还是能够扩增出来，而且也很好！

• vcve (2016-2-10 19:37:20)

  
  我做RACE也是出现这个情况，实在得不到单一的条带,真心求教啊

• vcve (2016-2-10 19:37:52)

  QUOTE:

  原帖由 october7 于 2016-2-10 18:00 发表
  
  模版有没有降解

  我是组织抽的RNA发现降解的很少才反转的，结果就老师弥散，用特异性引物好有单一条带呢

• vcve (2016-2-10 19:38:09)

  QUOTE:

  原帖由 chengjie79 于 2016-2-10 18:00 发表
  
  我之前也遇到这样的情况，一开始实验做的很好，但是后来就弥散了，而且是之前好的重新做也是弥散的，真的是搞不懂什么原因，什么方法都用了，比如说换新的试剂，换反应体系等，但是结果还是弥散，有没有什么好办法解决这个问题，大家快 ...

  我也遇到过，真心搞不懂啊